Animal Tissue Direct PCR комплекти (үлгү алуу куралдары жок) Протокол
Комплекттин сүрөттөлүшү:
ДНКны өзүнчө экстракциялоосуз, тез жана жогорку сезгичтик менен ПЦР күчөтүү үчүн шаблон катары жаныбарлардын тканынын лизатын түз колдонуңуз.
◮Убакытты жана кымбат баалуу ДНКны тазалоо талап кылынбайт.
◮Үлгү суроо-талап аз, жөн гана бир үрөндү алып.
◮Майдалоо жана майдалоо сыяктуу атайын дарылоо талап кылынбайт жана операция жөнөкөй.
◮Оптималдаштырылган ПТР системасы ПТРге жогорку өзгөчөлүккө жана ПТР реакциясынын ингибиторлоруна күчтүүрөөк чыдамкайлыкка ээ болууга мүмкүндүк берет.
Сүрөттөмөлөр
Бул комплект ПЦР реакциялары үчүн жаныбарлардын ткандарынын үлгүлөрүнөн геномдук ДНКны тез чыгаруу үчүн уникалдуу лизис буфердик системасын колдонот, ошондуктан ал кеңири масштабдуу генетикалык тестирлөө үчүн өзгөчө ылайыктуу.
Лизис буферинен геномдук ДНКны чыгаруу процесси 65°С температурада 10-30 мүнөттүн ичинде аяктайт.Протеин жана РНКны жок кылуу сыяктуу башка процесстер талап кылынбайт жана чыгарылган изи ДНК ПТР реакциясы үчүн шаблон катары колдонулушу мүмкүн.
2 × PCR EasyTMМикс ПТР реакциясынын ингибиторлоруна күчтүү толеранттуулукка ээ жана эффективдүү жана спецификалык күчөтүү үчүн үлгү катары сыналуучу үлгүнүн лизатын колдоно алат.Бул реагент Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl камтыйт.2, реакция буфери, ПЦР оптимизатору жана стабилизатор.
D-Taq ДНК полимераза - бул Foregene тарабынан түз ПТР реакциялары үчүн атайын иштелип чыккан ДНК полимераза.D-Taq ДНК полимеразасы ПТР реакциясынын ар кандай ингибиторлоруна күчтүү толеранттуулукка ээ жана ар кандай татаал реакция системаларында ДНКнын издүү көлөмүн эффективдүү күчөтө алат жана күчөтүү ылдамдыгы 2Кб/мин жетиши мүмкүн, бул түздөн-түз ПТР реакциясы үчүн өзгөчө ылайыктуу.
Техникалык шарттар
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Комплекттин компоненттери
| I бөлүм | буфер AL |
| Foregene Protease | |
| 6× ДНК жүктөө буфери | |
| II бөлүм | 2 × PCR EasyTMMix |
Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары
■Убакытты жана кымбат ДНКны тазалоонун кереги жок
■ Үлгү суроо-талап аз, 5мг мал кыртышын сынаса болот.
■ Майдалоо жана майдалоо сыяктуу атайын дарылоо талап кылынбайт жана операция жөнөкөй.
■ Оптималдаштырылган ПТР системасы ПТРдин жогорку спецификасын жана ПТР реакциясынын ингибиторлоруна толеранттуулукту арттырат.
Комплекттин параметрлери
Колдонмо: жаныбарлардын ар кандай кыртыштары.
Үлгү лизистен чыккан ДНК: ПТР үлгүсү катары гана колдонулат.
Комплект төмөнкү максаттарда колдонулушу мүмкүн: трансгенозду идентификациялоо, жаныбарларды генотиптөө ж.б.
Иш агымы
Сактоо жана сактоо мөөнөтү
Бул комплекттин I бөлүгү 2-8де сакталышы керек℃.
Reagent Buffer AL кургак шарттарда 12 ай бою сакталышы мүмкүн;ал 2-8 сактоого болот℃узак сактоо үчүн.
Foregene Protease реагентинин уникалдуу формуласы бар.Анын активдүүлүгүн жана туруктуулугун камсыз кылуу үчүн аны 4тө сактаңыз℃12 айга.
Реагент 6×ДНК жүктөө буферин 4тө сактаса болот℃же -20℃узак убакыт бою.
Бул комплекттин II бөлүгү -20 сакталышы керек℃.
Реагент 2×PCR EasyTMМикс 12 айга -20да сакталат℃;ал тез-тез колдонулса, 4 да сакталышы мүмкүн℃кыска мөөнөттүү сактоо үчүн (10 күндүн ичинде колдонуу).
