• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Булкалдык тампон/FTA картасынын ДНК изоляциясынын комплекти

Комплекттин сүрөттөлүшү:

Булкалдык тампон/FTA картасынын үлгүлөрүнөн жогорку сапаттагы геномдук ДНКны тез тазалаңыз.

RNase булгануусу жок:Комплект тарабынан берилген бир гана ДНК тилкеси эксперимент учурунда RNase кошпостон геномдук ДНКдан РНКны алып салууга мүмкүндүк берет, бул лабораториянын экзогендик RNase менен булганышына жол бербейт.

Тез ылдамдык:Foregene Protease окшош протеазаларга караганда жогорку активдүүлүккө ээ жана кыртыш үлгүлөрүн тез сиңирет;операция жөнөкөй жана геномдук ДНК экстракциялоо операциясы 20-80 мүнөттүн ичинде бүтүшү мүмкүн.

Ыңгайлуу:Центрифугалоо бөлмө температурасында жүргүзүлөт жана 4°C төмөн температурада центрифугалоонун же ДНКнын этанолду чөктүрүүнүн кереги жок.

Коопсуздук:Эч кандай органикалык реагент алуу талап кылынбайт.

Жогорку сапат:Алынган геномдук ДНК чоң фрагменттерге ээ, РНКсы жок, RNase жок жана ар кандай эксперименттердин талаптарына жооп бере турган өтө төмөн иондук мазмуну бар.

Микроэлюция системасы:Ал геномдук ДНКнын концентрациясын жогорулата алат, ал ылдый агымдагы аныктоо же эксперимент үчүн ыңгайлуу.

алдынкы күч


Продукт чоо-жайы

Продукт тегдери

Көп берилүүчү суроолор

Description

Бул комплект букалдык тампондордон жана FTA картасынан (кан тактары) жогорку концентрациядагы геномдук ДНКны алуунун натыйжалуу жана тез ыкмасын камсыз кылат.Биздин компанияны колдонуу's уникалдуу ДНКдан турган кремний диоксиди мембранасынын спиндик мамычасы жана формуласы, Foregene Protease менен айкалышып, жогорку концентрациядагы, жогорку сапаттагы геномдук ДНКны 80 мүнөттө бөлүп алууга болот.Атайын иштелип чыккан кичинекей тазалоо тилкеси геномдук ДНКны байланыштырат жана ДНКны аз өлчөмдө (15мкл) алынган геномдук ДНКнын концентрациясын жогорулатуу үчүн элюция системасы, ал төмөнкү агым боюнча аныктоо же эксперимент үчүн ыңгайлуу.Комплект бир эле учурда бир же бир нече үлгүлөрдү иштете алат жана тазалоо процесси фенол, хлороформ сыяктуу органикалык заттарды экстракциялоону жана изопропанолду же этанолду чөктүрүүнү талап кылбайт жана операция жөнөкөй жана убакытты үнөмдөйт.

Техникалык шарттар

50 Preps

Комплекттин компоненттери

Буфер ST1

Буфер ST2
 Сызыктуу акриламид
Буфер PW
Буфер WB
Буфер EB
 Foregene Protease
ДНК гана тилкеси

Instructions

Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары

-РНазанын булгануусу жок: Комплект тарабынан берилген ДНК-гана тилкеси эксперимент учурунда RNase кошпостон геномдук ДНКдан РНКны алып салууга мүмкүндүк берет, бул лабораториянын экзогендик RNase менен булганышына жол бербейт.

-Fast ылдамдыгы: Foregene Protease окшош протеазаларга караганда жогорку активдүүлүккө ээ, үлгүлөрдү тез сиңирет;жөнөкөй операция.

- Ыңгайлуу: Центрифугалоо бөлмө температурасында жүргүзүлөт жана 4°C төмөн температурадагы центрифугалоонун же ДНКнын этанолду чөктүрүүнүн кереги жок.

-Коопсуздук: эч кандай органикалык реагент алуу талап кылынбайт.

-Жогорку сапат: Алынган геномдук ДНКнын чоң фрагменттери бар, РНК жок, RNase жок жана ар кандай эксперименттердин талаптарына жооп бере турган өтө төмөн иондук мазмун бар.

-Микроэлюция системасы: Ал геномдук ДНКнын концентрациясын жогорулата алат, бул ылдый агымдагы аныктоо же эксперимент үчүн ыңгайлуу.

Kit колдонмосу

Бул төмөнкү үлгүлөрдөн геномдук ДНКны тазалоо үчүн ылайыктуу: тиш тампондору, FTA картасы (кандын тактары).

Сактоо жана сактоо мөөнөтү

-Бул комплект бөлмө температурасында (15-25°С) кургак шартта 12 ай сакталат;узак мөөнөткө сактоо керек болсо, аны 2-8°С температурада сактоого болот.

Эскертүү: Төмөн температурада сакталган болсо, эритме жамгырга жакын болот.Колдонуудан мурун, эритмени бөлмө температурасында белгилүү бир убакытка чейин комплектке коюуну унутпаңыз.Зарыл болсо, аны 37°C суу мончосунда 10 мүнөткө чейин ысытып, чөктүрүүнү эритип, колдонуудан мурун аралаштырыңыз.

-Foregene Protease эритмеси уникалдуу формулага ээ, ал бөлмө температурасында узак убакыт (3 ай) сакталганда активдүү;анын активдүүлүгү жана туруктуулугу 4°С температурада сакталганда жакшыраак болот, андыктан аны 4°С температурада сактоо сунушталат, -20°С температурада сактабоо керектигин унутпаңыз.


  • Мурунку:
  • Кийинки:

  • Тазалоо колонкасы тыгылып калган

    Бул комплектте ДНКны геномдук экстракциялоо операциясында тазалоо тилкеси центрифугалоо кадамысыз үлгүдөгү ферменттик лизис аралашмасына түздөн-түз адсорбцияланат жана тазалоо тилкеси үлгүнүн толук эмес ферменттештирилгендигинен жана жогорку илешкектүүлүгүнөн улам бөгөлүшү мүмкүн.

    Төмөнкү мүмкүн болгон себептер болуп төмөнкүлөр саналат:

    1. ткандардын үлгүлөрүнүн толук эмес ферменттик сиңирүү.

    Сунуш: Foregene Protease үлгүсүн иштетүү убактысы ылайыктуу түрдө узартылышы мүмкүн же супернатантты 12,000 айн/мин (~13,400 × г) 5 мүнөткө центрифугалоодон кийин алууга болот.

    2. ткандардын үлгүлөрүн же чоң ткандарды ашыкча колдонуу.

    Сунуш: Бул үлгүдөгү 1 Buccal тампондон ашпаган жакшы;эгерде үлгү өтө чоң болсо, ST1 Buffer, Foregene Protease, ST2 буферинин дозасын жогорулатыңыз.

    3. Үлгү илешкектүүлүгү өтө жогору.

    Сунуш: Үлгүлөрдү геномдук ДНКны экстракциялоодон мурун 10 мМ Tris-HCl менен тийиштүү түрдө суюлтса болот.

    4. Кан картасынын фрагменттери сорулган.

    Сунуш: Кан тактын (FTA Card) геномдук экстракциясынын 6-кадамынын убактылуу центрифугалоо убактысын тийиштүү түрдө узартса болот.

    Төмөн түшүмдүүлүк же ДНК жок

    Көбүнчө геномдук ДНКнын түшүмдүүлүгүнө таасир этүүчү ар кандай факторлор бар, анын ичинде үлгүнүн келип чыгышы, үлгү сактоо шарттары, үлгүлөрдү даярдоо, манипуляция ж.б.

    Экстракция учурунда геномдук ДНКны алуу мүмкүн эмес

    Мүмкүн болгон себептер төмөнкүдөй:

    1. Үлгүлөрдү туура эмес сактоо же өтө узак убакытка сактоо ДНКнын геномдук бузулушуна алып келет.

    Сунуш: Оозеки тампондор жаңыдан алынган болушу керек жана геномдук ДНКны экстракциялоо операциялары үчүн консерваланган тампондорду колдонуу сунушталбайт;кан так үлгүлөрү сапаты квалификациялуу экенин камсыз кылуу керек жана сактоо мөөнөтү өтө көп болбошу керек.

    2. Ткантты өтө аз колдонуу тиешелүү геномдук ДНКнын алынбай калышына алып келиши мүмкүн.

    Сунуш: Операция боюнча нускамадагы тиш тампонунун үлгүсүн алуу боюнча нускамаларды аткарыңыз жана геномдук ДНКны экстракциялоо үчүн оозеки тампонго жетиштүү клеткалар тиркелиши үчүн мүмкүн болушунча көп жолу сүртүңүз;кандын тагы үлгүсүн алуу үчүн кандын тагы кесүүчү аянтын тийиштүү түрдө көбөйтүүгө болот.

    3. Foregene Protease туура эмес сакталып, анын активдүүлүгүнүн төмөндөшүнө же инактивацияланышына алып келет.

    Сунуш: Foregene Protease сактоо шарттарын ырастаңыз же аны ферменттик реакция үчүн жаңы Foregene Protease менен алмаштырыңыз.

    4. Комплекттин туура эмес сакталышы же сактоо мөөнөтү өтө узун, натыйжада комплекттин айрым тетиктери иштен чыгат.

    Сунуш: Тиешелүү процедуралар үчүн жаңы Buccal тампонунун ДНК изоляция комплектин сатып алыңыз.

    5. Буфер ВБ абсолюттук этанолду кошпойт.

    Сунуш: буфер WB абсолюттук этанолдун туура көлөмүн кошо тургандыгын ырастаңыз.

    6. Элюент силикон пленкага туура кошулган эмес.

    Сунуш: Силикон мембранасынын ортосуна 65 °C алдын ала жылытылган элюент тамчыларын кошуп, элюциянын эффективдүүлүгүн жогорулатуу үчүн бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырыңыз.

    Төмөн кирешелүү геномдук ДНК бөлүнүп алынган

    Төмөнкү мүмкүн болгон себептер болуп төмөнкүлөр саналат:

    1. Үлгүлөрдү туура эмес сактоо же өтө узак убакытка сактоо ДНКнын геномдук бузулушуна алып келет.

    Сунуш: Оозеки тампондор жаңыдан алынганы жакшы жана консерваланган тампондор геномдук ДНК экстракциясы үчүн колдонулбашы керек.

    2. Эгерде кыртыш үлгүсүнүн көлөмү өтө аз болсо, алынган геномдук ДНКнын мазмуну азыраак болот.

    Сунуш: Операциялык колдонмодогу оозеки тампондун үлгүсүн алуу боюнча нускамаларды аткарыңыз, геномдук ДНКны экстракциялоо үчүн оозеки тампонго жетиштүү клеткалар тиркелиши үчүн мүмкүн болушунча көп жолу сүртүңүз.

    3. Foregene Protease туура эмес сакталып, анын активдүүлүгүнүн төмөндөшүнө же инактивацияланышына алып келет.

    Сунуш: Foregene Protease сактоо шарттарын ырастаңыз же аны ферменттик реакция үчүн жаңы Foregene Protease менен алмаштырыңыз.

    4. Элюент маселеси.

    Сунуш: Элюция үчүн Buffer EB колдонуңуз;ddH колдонулса2О же башка элюенттер, элюаттын рН 7,0-8,5 ортосунда экендигин ырастаңыз.

    5. Элюат тамчылатып туура кошулган эмес.

    Сунуш: Элюенттик тамчыларды силикон мембранасынын ортосуна кошуп, элюциянын эффективдүүлүгүн жогорулатуу үчүн бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырыңыз.

    6. Эллюция суюктугу өтө аз топтолот.

    Сунуш: Инструкцияда талап кылынгандай геномдук ДНК элюциясы үчүн элюентти колдонуңуз, кеминде 15 мкл.

    Бөлүнгөн геномдук ДНКнын тазалыгы төмөн

    Төмөн геномдук ДНК тазалыгы төмөн агымдагы эксперименттердин ийгиликсиздигине же канааттандырарлык эмес натыйжаларга алып келиши мүмкүн, мисалы: ферменттерди кесүү мүмкүн эмес, ПТР кызыккан ген фрагментин ала албайт ж.б.

    Мүмкүн болгон себептер төмөнкүдөй:

    1. Гетеропротеиддердин булганышы, РНКнын булганышы.

    Талдоо: Тазалоо колонкасы Buffer PW менен жуулган эмес;Buffer PW жуу тазалоо колонкасы туура борбордон четтөө ылдамдыгы менен жуулбай калган.

    Сунуш: Этанолду кошуудан мурун үстүнкү затта жаан-чачын жок экенин текшериңиз;көрсөтмөлөргө ылайык тазалоо тилкесин жууш үчүн шектенбесек болот жана бул кадамды өткөрүп жиберүүгө болбойт.

    2. Иондор менен булгануу.

    Талдоо: Буфердик WB жуугуч тазалоо тилкеси жок кылынган же бир гана жолу жуулган, натыйжада калдык иондук булганууга алып келген.

    Сунуш: Буфер ВБны мүмкүн болушунча калдык иондорду жок кылуу үчүн 2 жолу жууп салыңыз.

    3. РНК ферментинин булганышы.

    Талдоо: Чет элдик RNases буферге кошулду;Буфер PW жуу операциясы туура эмес болуп, натыйжада RNase калдыктары пайда болуп, төмөнкү агымдагы РНК эксперименталдык операцияларына, мисалы, in vitro транскрипциясына таасир эткен.

    Сунуш: Foregene сериясынын нуклеиндик кычкыл изоляциясынын комплекттери РНКны RNase кошумча кошпостон алып салышы мүмкүн, андыктан буккалдык Swab/FTA картасынын ДНК изоляциясынын комплектине RNase кошуунун кереги жок;Buffer PW жуугуч тазалоо тилкесинин нускамаларын аткарыңыз жана бул кадамды өткөрүп жиберүүгө болбойт.

    4. Этанолдун калдыгы.

    Талдоо: Буфер WB тазалоо колонкасын жуугандан кийин бош түтүктү центрифугалоону жүргүзгөн жок.

    Сунуш: Туура бош түтүктү центрифугалоо операциясын нускамаларга ылайык аткарыңыз.

    5. Башка ыпластыктар.

    Талдоо: Сакталган үлгүлөр же атайын үлгүлөр алдын ала иштетилбейт.

    Сунуш: Көрсөтүлгөндөй үлгүнү кылдаттык менен алдын ала тазалаңыз.

    Бул жерге билдирүүңүздү жазып, бизге жөнөтүңүз

    байланыштууПродукциялар