Lnc-RT Heroᵀᴹ I(GDNase менен)(lncRNAдан биринчи катардагы cDNA синтези үчүн супер премикс)
Техникалык шарттар
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase менен) геномдук ДНКнын булганышын тез алып салуу үчүн lncRNA үчүн атайын иштелип чыккан тескери транскрипция системасы.5×gDNase Mix РНКдагы калган геномду 42°C температурада 2 мүнөткө тез алып салуу менен qPCR натыйжаларына геномдун кийлигишүүсүн эффективдүү болтурбай коё алат.
5×L-RT HeroTM Mix курамында Foregene тарабынан атайын иштелип чыккан Foregene LncRNA Reverse Transcriptase камтылган, ал lncRNA жана башка узун РНК комплекстүү шаблондор үчүн атайын тескери транскриптазанын жаңы түрү, РНКга жакындыгы жана кайра жаздыруу эффективдүүлүгү жогору.Оптимизацияланган система тескери транскрипция ылдамдыгын тездетет жана жогорку GC мазмуну жана татаал экинчи структурасы бар РНК шаблондорун оңой транскрипциялай алат.Биринчи катардагы cDNA синтези 42°C температурада 15 мүнөттө бүтүшү мүмкүн.
Комплекттин компоненттери
| 5× gDNase Mix |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-Free ddH2O |
| Instructions |
Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары
■2 мүнөттүн ичинде шаблондогу гДНКны алып салуучу гДНКны жок кылуунун эффективдүү мүмкүнчүлүгү.
■ Ал lncRNAнын транскрипциясын эффективдүү тескери кыла алат.Кайтарым транскрипция продуктусу qPCR дуушар болгондо, Ct мааниси кадимки тескери транскрипция системасынан төмөн болот.
■ Эффективдүү тескери транскрипция системасы, cDNAнын биринчи тилкесинин синтезин аяктоо үчүн болгону 15 мүнөт талап кылынат.
■ Татаал калыптар: жогорку GC мазмуну жана татаал экинчи структурасы бар шаблондор да жогорку эффективдүүлүк менен артка кайтарылышы мүмкүн.
■ Жогорку сезгичтиктеги тескери транскрипция системасы, pg деңгээлиндеги шаблондор да жогорку сапаттагы cDNA ала алат.
■ Тескери транскрипция системасы жогорку термикалык туруктуулукка ээ, оптималдуу реакция температурасы 42℃, жана ал дагы эле 50 жакшы тескери транскрипция аткарууга ээ℃.
Kit колдонмосу
lncRNA салыштырмалуу сандык анализ.
lncRNA абсолюттук сандык анализи.
Ал РНК вирусу сыяктуу изи РНКны тез жана так талдай алат.
Жогорку GC мазмуну же татаал экинчи структурасы бар РНК шаблондорунун тескери транскрипциясы.
Иш агымы
Сактоо жана сактоо мөөнөтү
комплект -20 сактоо керек°C. Продукцияны -20 температурада туруктуу муздаткычта сактаңыз°C алгандан кийин дароо.Сактоо шарттары ылайыктуу болсо, продукт 1 жылдык жарактуулук мөөнөтүнүн ичинде эч кандай натыйжалуулугун начарлатпайт.
Проблемаларды талдоо боюнча колдонмо
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-конкреттүү күчөтүү
1. Негизсиз праймер дизайны
Сунуш: Примерлерди долбоорлоо принциптерине ылайык долбоорлоо.
2. Геном калдыктары.
Сунуш: gDNA алып салуу реакциясынын биринчи кадамы температурасы 42°C экенин жана реакциянын убактысын 5 мүнөткө чейин узартса болорун текшериңиз.
RT-qPCR тарабынан күчөтүү сигналы жок
1. РНК бузулат.
Сунуш: РНКны экстракциялоо үчүн материал мүмкүн болушунча жаңы болушу керек жана жогорку сапаттагы жана таза РНКны колдонуу керек.
2. РНК ингибиторлорду камтыйт.
Сунуш: Тескери транскрипциянын ингибиторлоруна көбүнчө SDS, гуанидин туздары, ЭДТА ж.б. кирет. Ингибиторлорду алып салуу үчүн РНК чөкмөсүн 70% этанол менен жууш сунушталат.
3. Праймерди долбоорлоо маселелери.
Сунуш: Праймерди долбоорлоо принцибине ылайык, праймерлерди текшерүү үчүн кайра конструкциялаңыз.
Максаттуу тилке бош башкарууда пайда болот
1. Иштеп жаткан аспаптардын же реагенттердин булганышы.
Сунуш: Эксперимент үчүн бардык реагенттер же жабдуулар автоклавда болушу керек.ДНК үлгүлөрү пипеткага сорулуп же центрифуга түтүкчөсүнөн төгүлүп кетпеши үчүн кармаганда этият жана жумшак болуңуз.
2. Контаминация ПТР реакциясынын системасын даярдоодо болгон.
Сунуш: Колдонууда зарыл болгон сактык чараларын көрүңүз, мисалы: латекс кол каптарды кийүү, чыпкалардын учтарын колдонуу.Булганууга каршы системада Real Time ПТР аралашмасын колдонуңуз.
3. Праймерлер бузулган.
Сунуш: праймерлердин бузулганын аныктоо үчүн SDS-PAGE электрофорезин колдонуңуз жана флуоресценцияны аныктоо эксперименттери үчүн жаңы праймерлер менен алмаштырыңыз.
Instruction Manual:
