• facebook
  • linkedin
  • youtube

Антителолор, ошондой эле иммуноглобулиндер (Ig) деп аталат, антигендер менен атайын байланышкан гликопротеиддер.
 
Кадимки антителолорду даярдоо жаныбарларды иммунизациялоо жана антисерумду чогултуу жолу менен өндүрүлөт.Демек, антисерумда адатта башка байланышпаган антигендерге жана сывороткадагы башка белок компоненттерине каршы антителолор бар.Жалпы антиген молекулалары негизинен бир нече ар кандай эпитопторду камтыйт, ошондуктан кадимки антителолор да бир нече ар кандай эпитопторго каршы антителолордун аралашмасы болуп саналат.Атүгүл бир эле эпитопко каршы багытталган кадимки кан сары суусунун антителолору дагы ар кандай В клеткасынын клондору тарабынан өндүрүлгөн гетерогендүү антителолордон турат.Ошондуктан, кадимки сывороткадагы антителолор поликлоналдык антителолор же кыскача поликлоналдык антителолор деп да аталат.
 
Моноклоналдык антитело (моноклоналдык антитело) бир В-клетканын клону тарабынан өндүрүлгөн жана белгилүү бир эпитопко каршы гана багытталган өтө бирдей антитело.Ал, адатта, гибридома технологиясы менен даярдалат — гибридома антитело технологиясы В клеткаларын спецификалык антителолорду жана чексиз өсүү жөндөмдүүлүгүнө ээ миелома клеткаларын B-клетка гибридомаларына бөлүп чыгаруу жөндөмү менен бириктирип, клеткаларды бириктирүү технологиясына негизделген.Бул гибридома клеткасы ата-энелик клетканын өзгөчөлүктөрүнө ээ.Ал миелома клеткалары сыяктуу in vitro чексиз жана өлбөс көбөйө алат жана көк боор лимфоциттери сыяктуу спецификалык антителолорду синтездеп, бөлүп чыгара алат.Клондоштуруу жолу менен бир гибридома клеткасынан алынган моноклоналдык линияны, башкача айтканда гибридома клетка линиясын алууга болот.Ал чыгарган антителолор ошол эле антигендик детерминантка, башкача айтканда, моноклоналдык антителолорго каршы өтө гомогендүү антителолор.
 
Антителолор бир же бир нече Y түрүндөгү мономерлер (б.а. моноклоналдык антителолор же поликлоналдык антителолор) катары бар.Ар бир Y түрүндөгү мономер 4 полипептиддик чынжырдан, анын ичинде эки бирдей оор чынжырдан жана эки бирдей жеңил чынжырдан турат.Жеңил чынжыр жана оор чынжыр молекулалык салмагына жараша аталат.Y түрүндөгү түзүлүштүн үстү антигенди байланыштыруучу жер болгон өзгөрмө аймак болуп саналат.(Detai био-моноклоналдык антитело концепциясынан үзүндү)
 
Антителолордун түзүлүшү
1Оор чынжыр
Сүт эмүүчүлөрдүн Ig оор чынжырларынын беш түрү бар, алар грек тамгалары менен аталган α, δ, ε, γ жана μ.Тиешелүү антителолор IgA, IgD, IgE, IgG жана IgM деп аталат.Ар кандай оор чынжырлар өлчөмү жана курамы боюнча айырмаланат.α жана γ болжол менен 450 аминокислоталарды камтыйт, ал эми μ жана ε болжол менен 550 аминокислоталарды камтыйт.
Ар бир оор чынжыр эки аймакка ээ: туруктуу аймак жана өзгөрмө аймак.Бир типтеги бардык антителолор бирдей туруктуу аймакка ээ, бирок ар кандай типтеги антителолордун ортосунда айырмачылыктар бар.Оор чынжырлардын туруктуу аймактары γ, α жана δ тандемде үч Ig доменинен турат, анын ийкемдүүлүгүн жогорулатуу үчүн шарнир аймагы бар;оор чынжырлардын μ жана ε туруктуу аймактары 4 Ig доменинен турат.Ар түрдүү В клеткалары тарабынан өндүрүлгөн антителолордун оор чынжырынын өзгөрмө аймагы ар башка, бирок ошол эле В клеткасы же клетка клону тарабынан өндүрүлгөн антителонун өзгөрмө аймагы бирдей жана ар бир оор чынжырдын өзгөрмөлүү аймагынын узундугу болжол менен 110 аминокислота., Жана бирдиктүү Ig доменин түзөт.
 
Жеңил чынжыр
Сүт эмүүчүлөрдө жеңил чынжырлардын эки гана түрү бар: ламбда жана каппа түрү.Ар бир жеңил чынжыр эки байланышкан доменге ээ: туруктуу аймак жана өзгөрүлмө аймак.Жеңил чынжырдын узундугу болжол менен 211~217 аминокислотадан турат.Ар бир антителодо камтылган эки жеңил чынжыр дайыма бирдей.Сүт эмүүчүлөр үчүн ар бир антителодогу жеңил чынжырдын бир гана түрү бар: каппа же ламбда.Кээ бир төмөнкү омурткалууларда, мисалы, кемирчектүү балыктарда (кемирчек балыктар) жана сөөктүү балыктарда iota (iota) түрү сыяктуу жеңил чынжырлардын башка түрлөрү да кездешет.
 
Fab жана Fc сегменттери
Fc сегменти антителолорду белгилөө үчүн түздөн-түз ферменттер же флуоресценттик боёктор менен айкалыштырылышы мүмкүн.Бул ELISA процессинде антитело пластинкага кагылган бөлүк, ошондой эле экинчи антитело иммунопреципитацияда, иммуноблоттингде жана иммуногистохимияда таанылган жана байланышкан бөлүк.Антителолор папаин сыяктуу протеолиттик ферменттердин жардамы менен эки F(ab) сегментине жана бир Fc сегментине гидролиздениши мүмкүн же алар шарнирдик аймактан пепсин менен талкаланып, бир F(ab)2 сегментине жана бир Fc сегментине гидролиздениши мүмкүн.IgG антитело сыныктары кээде абдан пайдалуу.Fc сегментинин жетишсиздигинен F(ab) сегменти антиген менен чөкпөйт, ал in vivo изилдөөлөрүндө иммундук клеткалар тарабынан кармалбайт.Кичинекей молекулярдык фрагменттерден жана кайчылаш байланыш функциясынын жоктугунан (Fc сегментинин жоктугунан) Fab сегменти функционалдык изилдөөлөрдө радиобелгилөө үчүн, ал эми Fc сегменти негизинен гистохимиялык боёодо бөгөт коюучу агент катары колдонулат.
 
Өзгөрмө жана туруктуу аймактар
Өзгөрүлмө аймак (V аймак) N-терминусуна жакын Н чынжырынын 1/5 же 1/4 бөлүгүндө (болжол менен 118 аминокислота калдыктарын камтыган) жана L чынжырынын N-терминусуна жакын 1/2 бөлүгүндө (болжол менен 108-111 аминокислота калдыктарын камтыган) жайгашкан.Ар бир V аймакта чынжыр ичиндеги дисульфиддик байланыштар аркылуу түзүлгөн пептиддик шакек бар жана ар бир пептиддик шакекче болжол менен 67ден 75ке чейин аминокислота калдыктарын камтыйт.V аймактагы аминокислоталардын составы жана жайгашуусу антителонун антиген менен байланышуу өзгөчөлүгүн аныктайт.V чөлкөмүндөгү аминокислоталардын дайыма өзгөрүп туруучу түрлөрүнөн жана ырааттуулугунан улам, ар кандай байланыштыруучу антиген спецификасына ээ болгон көптөгөн антителолор пайда болушу мүмкүн.L чынжырынын жана H чынжырынын V аймактары тиешелүүлүгүнө жараша VL жана VH деп аталат.VL жана VH, аминокислота курамы жана кээ бир жергиликтүү аймактардын ырааттуулугу вариациянын жогорку даражасына ээ.Бул аймактар ​​гипер өзгөрмө аймактар ​​(HVR) деп аталат.V аймактагы HVR эмес бөлүктөрүнүн аминокислоталардын курамы жана жайгашуусу салыштырмалуу консервативдүү болуп саналат, ал алкактык аймак деп аталат.VLде үч гипервариаивдүү аймак бар, алар көбүнчө аминокислота калдыктарында 24-34 жана 89дан 97ге чейин жайгашкан.VL жана VH үч HVRs тиешелүүлүгүнө жараша HVR1, HVR2 жана HVR3 деп аталат.Рентген нурларынын кристаллдык дифракциясын изилдөө жана талдоо гипервариациялык аймак чындыгында антитело антигени туташуучу жер экенин далилдеди, ошондуктан ал комплементарлык аныктоочу аймак (CDR) деп аталат.VL жана VH HVR1, HVR2 жана HVR3 тиешелүүлүгүнө жараша CDR1, CDR2 жана CDR3 деп атоого болот.Жалпысынан алганда, CDR3 гиперварибилдүүлүктүн жогору даражасына ээ.Гипервариалуу аймак, ошондой эле Ig молекулаларынын идиотиптик детерминанттары бар негизги жер.Көпчүлүк учурларда, Н чынжыр антиген менен байланышта маанилүү ролду ойнойт.
2Туруктуу аймак (С аймагы)Н чынжырынын 3/4 же 4/5 бөлүгүндө (болжол менен 119 аминокислотадан С терминалына чейин) С терминалына жакын жана 1/2 бөлүгүндө (болжол менен 105 аминокислота калдыктары бар) L чынжырынын С терминалына жакын жайгашкан.H чынжырынын ар бир функционалдуу аймагында болжол менен 110 аминокислота калдыктары жана дисульфиддик байланыштар менен байланышкан 50-60 аминокислота калдыктарынан турган пептиддик шакек бар.Бул аймактын аминокислоталардын курамы жана жайгашуусу бир эле жаныбардын Ig изотип L чынжырында жана бир типтеги H чынжырында салыштырмалуу туруктуу.Ошол эле, ал тиешелүү антиген менен спецификалык түрдө гана байланыша алат, бирок анын С аймагынын структурасы бирдей, башкача айтканда, антигендик касиети бирдей.Ат-адамга каршы IgG экинчилик антитело (же антитело) ар кандай экзотоксиндерге каршы антителолордун (IgG) эки айкалышы менен айкалыштырылышы мүмкүн.Бул экинчилик антителолорду даярдоо жана флуоресцеинди, изотопторду, ферменттерди жана башка белгиленген антителолорду колдонуу үчүн маанилүү негиз болуп саналат.
 
 
Тектеш продуктылар:
Cell Direct RT-qPCR комплекти

 

 


Посттун убактысы: 2021-жылдын 30-сентябрына чейин