• facebook
  • linkedin
  • youtube

Букалдык тампон/FTA картасы ДНКны экстракциялоо комплекти

Мүмкүн болгон көйгөйлөрдүн төмөнкү анализиBuccalтампон/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

 

Тазалоо колонкасы тыгылып калган

 

 

Бул комплектте ДНКны геномдук экстракциялоо операциясында тазалоо тилкеси центрифугалоо кадамысыз үлгүдөгү ферменттик лизис аралашмасына түздөн-түз адсорбцияланат жана тазалоо тилкеси үлгүнүн толук эмес ферменттештирилгендигинен жана жогорку илешкектүүлүгүнөн улам бөгөлүшү мүмкүн.

Төмөнкү мүмкүн болгон себептер болуп төмөнкүлөр саналат:

1. ткандардын үлгүлөрүнүн толук эмес ферменттик сиңирүү.

Сунуш: Foregene Protease үлгүсүн иштетүү убактысы тиешелүү түрдө узартылышы мүмкүн же супернатант 12,000 айн/мин (~13,400) центрифугалангандан кийин алынышы мүмкүн.× ж) 5 мин.

2. ткандардын үлгүлөрүн же чоң ткандарды ашыкча колдонуу.

Сунуш: 1ден ашпаган жакшыBuccal үлгүдөгү тампон;эгерде үлгү өтө чоң болсо, ST1 Buffer, Foregene Protease, ST2 буферинин дозасын жогорулатыңыз.

3. Үлгү илешкектүүлүгү өтө жогору.

Сунуш: Үлгүлөрдү геномдук ДНКны экстракциялоодон мурун 10 мМ Tris-HCl менен тийиштүү түрдө суюлтса болот.

4. Кан картасынын фрагменттери сорулган.

Сунуш: Кан тактын (FTA Card) геномдук экстракциясынын 6-кадамынын убактылуу центрифугалоо убактысын тийиштүү түрдө узартса болот.

 

Төмөн түшүмдүүлүк же ДНК жок

 

Көбүнчө геномдук ДНКнын түшүмдүүлүгүнө таасир этүүчү ар кандай факторлор бар, анын ичинде үлгүнүн келип чыгышы, үлгү сактоо шарттары, үлгүлөрдү даярдоо, манипуляция ж.б.

Экстракция учурунда геномдук ДНКны алуу мүмкүн эмес

Мүмкүн болгон себептер төмөнкүдөй:

1. Үлгүлөрдү туура эмес сактоо же өтө узак убакытка сактоо ДНКнын геномдук бузулушуна алып келет.

Сунуш: Оозеки тампондор жаңыдан алынган болушу керек жана геномдук ДНКны экстракциялоо операциялары үчүн консерваланган тампондорду колдонуу сунушталбайт;кан так үлгүлөрү сапаты квалификациялуу экенин камсыз кылуу керек жана сактоо мөөнөтү өтө көп болбошу керек.

2. Ткантты өтө аз колдонуу тиешелүү геномдук ДНКнын алынбай калышына алып келиши мүмкүн.

Сунуш: төмөнкүнү аткарыңызbuccal Операциянын нускамасында тампондун үлгүсүн алуу боюнча нускамаларды жазыңыз жана геномдук ДНКны алуу үчүн оозеки тампонго жетиштүү клеткалар тиркелиши үчүн мүмкүн болушунча көп жолу сүртүңүз;кандын тагы үлгүсүн алуу үчүн кандын тагы кесүүчү аянтын тийиштүү түрдө көбөйтүүгө болот.

3. Foregene Protease туура эмес сакталып, анын активдүүлүгүнүн төмөндөшүнө же инактивацияланышына алып келет.

Сунуш: Сактоо шарттарын ырастаңызФoregene Protease же аны ферменттик реакция үчүн жаңы Foregene Protease менен алмаштырыңыз.

4. Комплекттин туура эмес сакталышы же сактоо мөөнөтү өтө узун, натыйжада комплекттин айрым тетиктери иштен чыгат.

Сунуш: Жаңысын сатып алыңызBuccal тампон ДНКизоляция тиешелүү процедуралар үчүн комплект.

5. Буфер ВБ абсолюттук этанолду кошпойт.

Сунуш: буфер WB абсолюттук этанолдун туура көлөмүн кошо тургандыгын ырастаңыз.

6. Элюент силикон пленкага туура кошулган эмес.

Сунуш: 65 кошуу°Cалдын ала жылытылган элюент силикон мембранасынын ортосуна түшүп, элюциянын эффективдүүлүгүн жогорулатуу үчүн бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырылат.

Lкирешелүү геномдук ДНК изоляцияланган

Төмөнкү мүмкүн болгон себептер болуп төмөнкүлөр саналат:

1. Үлгүлөрдү туура эмес сактоо же өтө узак убакытка сактоо ДНКнын геномдук бузулушуна алып келет.

Сунуш: Оозеки тампондор жаңыдан алынганы жакшы жана консерваланган тампондор геномдук ДНК экстракциясы үчүн колдонулбашы керек.

2. Эгерде кыртыш үлгүсүнүн көлөмү өтө аз болсо, алынган геномдук ДНКнын мазмуну азыраак болот.

Сунуш: Операциялык колдонмодогу оозеки тампондун үлгүсүн алуу боюнча нускамаларды аткарыңыз, геномдук ДНКны экстракциялоо үчүн оозеки тампонго жетиштүү клеткалар тиркелиши үчүн мүмкүн болушунча көп жолу сүртүңүз.

3. Foregene Protease туура эмес сакталып, анын активдүүлүгүнүн төмөндөшүнө же инактивацияланышына алып келет.

Сунуш: Сактоо шарттарын ырастаңызthe Foregene Protease же жаңы менен алмаштыруу Ферменттик реакция үчүн Foregene Protease.

4. Элюент маселеси.

Сунуш: Элюция үчүн Buffer EB колдонуңуз;ddH колдонулса2О же башка элюенттер, элюаттын рН 7,0-8,5 ортосунда экендигин ырастаңыз.

5. Элюат тамчылатып туура кошулган эмес.

Сунуш: Элюенттик тамчыларды силикон мембранасынын ортосуна кошуп, элюциянын эффективдүүлүгүн жогорулатуу үчүн бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырыңыз.

6. Эллюция суюктугу өтө аз топтолот.

Сунуш: Жок дегенде нускамада талап кылынгандай геномдук ДНК элюциясы үчүн элюентти колдонуңузаз эмес 15ке карагандаμl.

Lэй тазалык of геномдук ДНКизоляцияланган

Төмөн геномдук ДНК тазалыгы төмөн агымдагы эксперименттердин ийгиликсиздигине же канааттандырарлык эмес натыйжаларга алып келиши мүмкүн, мисалы: ферменттерди кесүү мүмкүн эмес, ПТР кызыккан ген фрагментин ала албайт ж.б.

Мүмкүн болгон себептер төмөнкүдөй:

1. Гетеропротеиддердин булганышы, РНКнын булганышы.

Талдоо: Тазалоо колонкасы Buffer PW менен жуулган эмес;Buffer PW жуу тазалоо колонкасы туура борбордон четтөө ылдамдыгы менен жуулбай калган.

Сунуш: Этанолду кошуудан мурун үстүнкү затта жаан-чачын жок экенин текшериңиз;көрсөтмөлөргө ылайык тазалоо тилкесин жууш үчүн шектенбесек болот жана бул кадамды өткөрүп жиберүүгө болбойт.

2. Иондор менен булгануу.

Талдоо: Буфердик WB жуугуч тазалоо тилкеси жок кылынган же бир гана жолу жуулган, натыйжада калдык иондук булганууга алып келген.

Сунуш: Буфер ВБны мүмкүн болушунча калдык иондорду жок кылуу үчүн 2 жолу жууп салыңыз.

3. РНК ферментинин булганышы.

Талдоо: Чет элдик RNases буферге кошулду;Буфер PW жуу операциясы туура эмес болуп, натыйжада RNase калдыктары пайда болуп, төмөнкү агымдагы РНК эксперименталдык операцияларына, мисалы, in vitro транскрипциясына таасир эткен.

Сунуш: Foregene сериясы нуклеиндик кислотаisolaион комплекттери РНКны кошумча RNase кошпостон алып салышы мүмкүн,ошентип Buccal Swab/FTA Card ДНК изоляциялоо комплектикерек't RNase кошуу;Buffer PW жуугуч тазалоо тилкесинин нускамаларын аткарыңыз жана бул кадамды өткөрүп жиберүүгө болбойт.

4. Этанолдун калдыгы.

Талдоо: Буфер WB тазалоо колонкасын жуугандан кийин бош түтүктү центрифугалоону жүргүзгөн жок.

Сунуш: Туура бош түтүктү центрифугалоо операциясын нускамаларга ылайык аткарыңыз.

5. Башка ыпластыктар.

Талдоо: Сакталган үлгүлөр же атайын үлгүлөр алдын ала иштетилбейт.

Сунуш: Көрсөтүлгөндөй үлгүнү кылдаттык менен алдын ала тазалаңыз.

 


Посттун убактысы: 18-март-2022