• facebook
  • linkedin
  • youtube

1: Эксперименттик материалдарды убагында алмаштырыңыз

news812 (1) 

(NTC) терс башкарууну орнотуп, аны көп жолу кайталаңыз.Лабораторияда ПЦР продуктунун булганышы бар экендиги аныкталгандан кийин, бардык эксперименталдык материалдарды өз убагында алмаштырыңыз.Мисалы: праймерлерди кайра суюлтуңуз жана даярдаңыз, пипетка учу, EP түтүгү, ddH2O ж.б. кайра стерилизациялаңыз, жаңы пипетка менен алмаштырыңыз жана ПТР эксперименттерин жүргүзүү үчүн башка лабораторияларды убактылуу карызга алыңыз.Булганган лаборатория экспериментти улантуудан мурда ПТР продуктунун булгануусу жок кылынганга чейин желдетилип, ультрафиолет нурлары менен нурланууга тийиш.

2: UV экспозиция убактысын узартуу

news812 (2)

Белгилей кетсек, ДНКнын булганышын жок кылуу үчүн үзгүлтүксүз ультрафиолет нурлануусун демейдегиден 2 саатка узартуу керек.Ошого карабастан, ДНКнын булганышынын майда фрагменттерин (200б.п. төмөн) жок кылууга UV нурлануунун таасири дагы деле жакшы эмес.

Ультрафиолет толкун узундугу (нм) жалпысынан 254/300нм жана ал 30 мүнөт нурланууга жетиштүү.Белгилей кетчү нерсе, ПЦР продуктуларынын калдыктарынын булганышын жок кылуу үчүн UV нурун тандоодо ПТР продуктунун узундугун жана продукциянын ырааттуулугунда базалардын бөлүштүрүлүшүн эске алуу керек.Ультрафиолет нурлануусу 500 биттен жогору узун фрагменттерде гана эффективдүү, ал эми кыска фрагменттерге анча деле таасир этпейт.

Ультрафиолет нурлануу учурунда ПТР продуктунун пиримидиндик негиздери димерлерди пайда кылат.Бул димерлер узартууну токтото алат, бирок ДНК чынжырындагы бардык пиримидиндер димерлерди түзө албайт, ал эми УК нурлануусу да димерлерди бузушу мүмкүн..Димердин пайда болуу даражасы UV толкун узундугуна, пиримидин димеринин түрүнө жана димер сайтына чектеш нуклеотиддердин ырааттуулугуна жараша болот.Ошондуктан, эгерде ПТР күчөтүлгөн фрагменттери аз болсо, анда UNG анти-ПЦР продуктунун булгануу системасын колдонуу сунушталат.

3: Көбүнчө колдонулган ДНКнын булганышын тазалагычтар

news812 (3)

Пипеткалар кошулганда аэрозолдор оңой пайда болот, аны болтурбоо кыйын жана ал бат эле тунуп калат.Ошондуктан, бул, албетте, ДНКнын булганышынын жайылышын алдын алуу үчүн атайын ДНКны булгануучу тазалагычтарды көп колдонуу жакшы тандоо.

4: UNG булганууга каршы системасын колдонуңуз

news812 (4)

ПТР продуктунун булгануусу алынып салынгандан кийин, сыноо лабораториясы ПТР продуктунун булганышын алдын алуу үчүн UNG анти-ПЦР продуктунун булгануу системасын колдоно алат.Жалпы лабораторияларда сиз жөнөкөй эксперименталдык бөлүктөрдү жасай аласыз, ПТР продуктусунун аймагын башка аймактардан катуу бөлүп, лабораториялык эрежелерди жана эрежелерди белгилей аласыз жана ПЦР продуктунун булганышын алдын алуу үчүн тиешелүү тренингдерди өткөрө аласыз.

Сунуштар: Жөнөкөй ПТР лабораториясын түзүү, жакшы ПТР чөйрөсүн сактоо, стандарттуу ПТР операциялык процедураларын түзүү жана экспериментаторлордун катуу операциялык маалымдуулугун жогорулатуу ПТР эксперименттеринин булганышын алдын алуунун же азайтуунун ачкычы болуп саналат.


Посттун убактысы: 12-август-2021