SOP системасын куруу

Эксперимент кызматкерлеринин жүрүм-турумун стандартташтыруу үчүн ПТР эксперимент SOP түзүү.

Экспериментаторлор операциялык процедураларды так сакташат жана адам факторлору менен шартталган ПТРдин булганышын азайтышат же операцияда булгануунун пайда болушуна жол бербейт.Мындан тышкары, экспериментатор тиешелүү кесиптик билимге жана көндүмгө ээ болушу керек, анын ичинде тиешелүү жабдууларды башкаруу, бүткүл иш процессин тактоо, булганууну тазалоо ыкмаларын жана лабораториялык сапатты көзөмөлдөө ыкмаларын өздөштүрүү, сыноонун натыйжаларын туура чечмелей билүү.

Стандарттык ПЦР лабораториясын куруу

ПЦР лабораториясы негизинен төрт аймакка бөлүнөт, атап айтканда реагент даярдоо аймагы, үлгүлөрдү иштетүү аймагы, күчөтүү аймагы жана күчөтүү продуктусун талдоо аймагы.Алгачкы эки аймак - күчтөндүрүүгө чейинки аймактар, ал эми акыркы эки аймак - күчөтүлгөндөн кийинки аймактар.Алдын-ала күчөтүү зонасы менен күчөтүлгөндөн кийинки зонаны катуу бөлүп коюу керек.Эксперименттик материалдар, реагенттер, эсепке алуу кагазы, калемдер, тазалоочу материалдар жана башкалар күчөтүлгөнгө чейинки аймактан күчөтүлгөндөн кийинки аймакка, башкача айтканда, реагент даярдоо аймагынан, үлгүлөрдү иштетүү аймагынан, күчөтүү аймагынан жана күчөтүү продуктусун анализдөө аймагынан агып чыгышы мүмкүн жана тескери багытта агып кетпеши керек.Лабораториядагы аба агымы да тескери багытта эмес, күчөтүлгөнгө чейинки аймактан күчөтүлгөндөн кийинки аймакка агышы керек.

Эксперименттик кадамдарды азайтыңыз

Эгерде лаборатория ПТР аныктоону жана идентификациялоону гана жүргүзсө, кадимки ПТРдин ордуна флуоресценттик сандык ПТРди колдонуу сунушталат.

Флуоресценттик сандык ПТРди аныктоонун натыйжаларын флуоресценттик сигналдар менен чогултууга жана анализдөөгө болот, андыктан реакциядан кийин электрофорез үчүн капкакты ачуунун кереги жок, бул аэрозолдорду пайда кылуу үчүн реакция продуктыларынын агып чыгышынан келип чыккан ПТР продуктуларынын булганышын болтурбайт.Гель электрофорезин жүктөө баскычында капкак тешиктеринин санын көбөйтсөңүз, аэрозолдук булгануу пайда болушу мүмкүн.Сандык ПТРди колдонууну жайылтуу жана сапаттык ПТРди акырындык менен алмаштыруу сунушталат.

UNG булганууга каршы системасын кабыл алуу

ПТР реакциясы үчүн UNG анти-ПЦР продуктунун булгануу системасы колдонулат.

Система dTTP ордуна dUTP колдонот.ПТР реакциясынан кийин бардык ПТР продуктулары (ДНК фрагменттери) dUTP менен кошулат;ПТР реакциясынын кийинки раундунда системага кошулган UNG ферменти 37°C температурада 5 мүнөт ПЦР алдында инкубацияланат, ал спецификалык болушу мүмкүн dUTP камтыган бардык ДНК фрагменттерин деградациялап, андан кийин ПТР реакциясын жүргүзөт.Бул ПЦР өнүмдөрүнөн келип чыккан аэрозолдук булганууну толугу менен жок кыла алат.Эффект төмөнкү сүрөттө көрсөтүлгөн:

Эскертүү: Түздөн-түз ПТР сериясы үчүн, сиз FJ Biotech компаниясынын ПТР продуктунун булганышына каршы системасынын серияларын тандай аласыз.

Сунуштоо

Кең масштабдуу генотиптүү тестирлөө жүргүзгөн лабораториялар үчүн, акылга сыярлык лабораторияларды куруудан тышкары, реагенттерди сыноо үчүн UNG анти-ПЦР продуктунун булгануу системасын колдонуу катуу сунушталат.

Эскертүү: Бул системаны колдонуу мурда пайда болгон ПТР продуктунун булганышын жок кыла албайт.Ошондуктан, UNG системасы тиешелүү тесттин башында колдонулушу керек, ал эми UNG системасы ар дайым ПТР өнүмдөрүнүн булганышын алдын алуу үчүн ПТР күчөтүү үчүн колдонулушу керек.Жалган позитив.

Чоң масштабдуу тестирлөө жүргүзүүдө Forge Biotechтин Direct PCR-UNG системасын колдонуу сунушталат, мисалы: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Өсүмдүк үрөнүн түз ПТР комплекти-UNG；

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Foregene комплекттеринин бул сериясы ПТР аныктоону тез жана кеңири масштабда гана жүргүзбөстөн, ПТР продуктунун булганышын эффективдүү болтурбай жана көзөмөлдөй алат.