Hot-start Taq ферменти кеңири колдонулат.Кадимки ДНК полимераза менен салыштырганда, ысык башталгыч Taq энзими кээ бир спецификалык эмес күчөтүүдөн жана праймердик димерлердин пайда болушунан натыйжалуу кача алат жана максаттуу генди күчөтүүнүн ийгилигинин ылдамдыгын натыйжалуу жакшыртат.Айрыкча генетикалык тестирлөө тармагында ысык баштоо Taq энзими өнөр жайда милдеттүү стандарт катары аныкталган жана кадимки ДНК полимераза колдонулбашы керек.Жогоруда айтылгандардан көрүнүп тургандай, ысык башталгыч Taq ферменттери кеңири колдонулат.Учурда ички рынокто ысык старттагы Taq ферменттеринин көптөгөн бренддери бар, бирок жогорку сапаттагы ысык башталгыч Taq ферменттери көп эмес.Көптөгөн ысык башталгыч Taq энзим продуктыларына туш болгондо, биз кантип тандоо керек?

1. Жогорку күчөтүү эффективдүүлүгү менен ысык баштоо Taq ферментин тандаңыз

ПТР күчөтүү натыйжалуулугу Taq энзиминин иштеши менен тыгыз байланышта.Жакшы Taq ферменттик реакция системасы оптималдаштырылгандан кийин, күчөтүү эффективдүүлүгү 95% дан жогору жана баштапкы калыптын суммасынын күчөтүү диапазону кең.Канааттандырарлык күчөтүү максаттуу гендин мазмуну төмөн болгондо алынышы мүмкүн, ал эми шаблондун көлөмү жогору болгондо уулануу оңой эмес жана экспоненциалдык күчтөнүү мезгили узак.Нашар иштеген Taq ферменти үчүн, реакция системасы көп жолу оптималдаштырылса дагы, күчөтүү эффективдүүлүгү дагы эле 90% дан аз, күчөтүү ийри сызыгынын “S” формасы ачык эмес, эңкейиш кичинекей, ийри сызыгы тегиз.Калыптын көлөмү аз болгондо, аны күчөтүү мүмкүн эмес, ал эми шаблондун көлөмү көп болгондо, күчөтүү эффектиси идеалдуу эмес.Ошондуктан, жогорку күчөтүү натыйжалуулугу менен ДНК полимеразаларды тандоо ПТР жана qPCR ийгилиги үчүн өтө маанилүү болуп саналат.

2. Күчтүү энзим күчү менен ысык баштоо Taq ферментин тандаңыз

Taq ферментинин ферменттик күчү күчөтүү эффективдүүлүгүнө байланыштуу.Жалпысынан алганда, ысык башталгыч Taq ферментинин ферменттик күчү канчалык күчтүү болсо, ПТР күчөшүнүн экспоненциалдык өсүү мезгили ошончолук көп болот, "S формасындагы" ийри сызык ошончолук көп болсо, флуоресценция сигналынын мааниси ошончолук жогору болот жана мультиплекстик ПТР аныктоого ошончолук ылайыктуу.Алсыз ферменттик күчкө ээ бренд ДНК полимеразалары жалпысынан 2-плекстүү реакцияларды гана колдой алат.3-плекстүү реакцияларды жасаганда, күчөтүү ийри сызыгы төмөн, флуоресценция сигналынын мааниси төмөн жана типтүү күчөтүү ийри сызыгы жок, ошондуктан натыйжаларды баалоо кыйын.

3. Жогорку сезгичтик менен ысык башталгыч Taq ферментин тандаңыз

Жалпысынан алганда, ДНК полимераза жогорку күчөтүү натыйжалуулугун жана жогорку сезгичтиги бар, бирок, ошондой эле карама-каршылыктар бар.Эгерде күчөтүлө турган үлгүнүн максаттуу генинин көптүгү төмөн болсо, Taq ферментинин күчөтүү сезгичтигин текшерүү сунушталат.Эң кеңири таралган аныктоо ыкмасы – максаттуу ген плазмидинин фрагментин 10 эсе же 5 эсе градиенттик суюлтуу, төмөнкү суюлтууда ПТР аныктоону жүргүзүү жана аныктоо сезгичтиги жогору болгон ысык башталгыч Taq ферментин тандоо.

Жогоруда айтылгандардан көрүнүп тургандай, изилдөөчүлөр өздөрүнүн эксперименталдык талаптарына жана каржылоо шарттарына ылайык тандоо керек.Кызуу башталгыч Taq ферментинин күчөтүү эффективдүүлүгүн жана сезгичтигин аныктоо үчүн градиенттик суюлтууну күчөтүү экспериментин жүргүзүү эң жакшы.

Foregene мисалы'Так ДНК Полимераза:

Foreasy HS Taq ДНК Полимераза

Description

Foreasy HS Taq ДНК Полимераза - ген рекомбинациялоо технологиясы менен Escherichia coli инженердик бактерияларында туюнтулган ДНК полимераза.Фермент уникалдуу реакция буфери менен айкалышкан, ал продуктту өтө туруктуу жана шайкеш кылат жана аныктоо реакциялары үчүн шаблон катары үлгү лизатын (Foregene Lysis системасы) түздөн-түз колдоно алат.

Колдонмо

Сапаттык ПТР жана тазаланган калыптарды жана тазаланбаган калыптарды сандык ПТР аныктоо.

Сапатты көзөмөлдөө

1.Экзогендик нуклеаздык активдүүлүк аныкталган жок

2.PCR ыкмасы хост жок калдык геномдук ДНКны аныктоо

3.Бул адамдын геномундагы бир копиялуу гендерди эффективдүү түрдө күчөтө алат

бир жума бою бөлмө температурасында 4.Store, noobvious иш өзгөрүүлөр

Продукт чоо-жайы: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/