A260/A230 төмөн катышы, адатта, 230nm максималдуу жутуу толкун узундугу менен аралашмалар менен шартталган.Келгиле, бул аралашмалар эмнелерди камтыйт:

• Жалпы булгоочу заттар	Абсорбция толкун узундугу	Катыштын эффектиси
  Протеин	~230нм жана 280нм	Бир убакта кыскартуу А260/A 280жана А260/A 280катыштар
  Гуанидин тузу	220-240 нм	А азайтыңыз260/A 280катышы
  Фенол	~270нм	-
  Trizol	~230нм жана 270нм	А азайтыңыз260/A 280катышы
  EDTA	~230нм	А азайтыңыз260/A 280катышы
  Этанол	230-240 нм	А азайтыңыз260/A 280катышы

 
 
 
Абсорбциялык толкун узундугу жана жалпы булгоочу заттардын контрасттык мааниси

Pротеиндин булганышы
Белоктун булганышы нуклеин кислотасын алуу процессинде эң кеңири таралган булгануу катары каралышы мүмкүн.Белок жогорку суулуу фаза менен төмөнкү ортосунда болоторганикалыкфаза.Булгануу бир эле учурда A260/A280 жана A260/A230 катышын азайтат, ал эми A260/A230 катышы A260/A280 катышына караганда айкыныраак өзгөрөт.
Кийинки мезгилдетескери транскрипцияor qPCR реакциялары, протеин калдыктары ферменттин иштешине тоскоол болушу мүмкүн.Протеиндин булганышын болтурбоонун эң жакшы жолу – үстүнкү затты соргондо “көп эмес, аз санда көп жолу” принцибин эстен чыгарбоо.

2. Гуанидиний булганышы
гидрохлорид (GuHCl) жана гуанидин тиоцианат (GTC) протеиндерди денатурациялоочу эффектке ээ, алар нуклеин кислотасын экстракциялоо процессинде клетка мембраналарын тез бузуп, белоктун денатурациясын жана преципитациясын пайда кылат.GuHCl жана GTC абсорбциялык толкун узундугу 220-240 нм жанакалдык гуанидин тузу A260/A230 катышын азайтат.Калган гуанидиний тузу катышын азайтат да,ылдыйкы эксперименттерге тийгизген таасири чындыгында жокко эсе.

3. Тризол менен булгануу
Trizol негизги компоненти фенол болуп саналат.Фенолдун негизги милдети клеткаларды лизис жана клеткалардагы белокторду жана нуклеин кислотасын бөлүп чыгаруу болуп саналат.Фенол протеиндерди эффективдүү денатуралай алат да, ал RNase активдүүлүгүн толугу менен токтото албайт.Ошондуктан, 8 -hydroxyquinoline , гуанидин isothiocyanate , β- mercaptoetanol, ж.б., эндогендик жана экзогендик RNase бөгөт коюу үчүн TRIzol кошулат.
Уюлдук РНКны чыгарып жатканда, Тризол клеткаларды тез лизиске жана клеткалардан бөлүнүп чыккан нуклеазага бөгөт коё алат, ал эми калган Trizol A260/A230 катышын кыйла азайтат.
Иштетүү ыкмасы: Центрифугалоодо тризолдун курамындагы фенол 4° жана бөлмө температурасында суу фазасында оңой эрээрин белгилей кетүү керек.

4. Этанол калдыктары
Этанол ДНКны туташтыруу үчүн акыркы процессте колдонулат, ал эми ДНК менен байланышы мүмкүн болгон туз иондорун эритүү.Абсорбциялык толкун узундугу эң жогоркусиңирүү чокусуэтанол да 230-240 нм, булошондой эле A260/A230 катышын азайтат.
Этанолдун калдыктарын болтурбоо ыкмасын акыркы элюция учурунда эки жолу кайталоого болоттүтүн капотэтанолдун толугу менен бууланышы үчүн эки мүнөткө сүзүү үчүн буферди кошуудан мурун.
Бирок бул катыш РНК сапатын баалоо индекси гана экенин билиши керек.Эгерде жогоруда айтылган операциялар катуу жөнгө салынса, катыш менен стандарттык диапазондун ортосундагы четтөө агымдын ылдый жагындагы эксперименттерге чоң таасирин тийгизбейт.
Тектеш продуктылар:
Жаныбарлардын жалпы РНК изоляциясынын комплекти
Өсүмдүктөрдүн жалпы РНК изоляциясынын комплекти
Клетканын жалпы РНК изоляциясынын комплекти
Plant Total RNA Isolation Kit Plus