• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq ДНК Полимераза

Foreasy HS Taq ДНК Полимераза өзгөчөлөнгөн сүрөт
  • Foreasy HS Taq ДНК Полимераза

Комплекттин сүрөттөлүшү:

◮Жогорку өзгөчөлүк: жогорку ысык баштоо активдүүлүгү менен фермент.

◮Тез күчөтүү: 10 сек/кб.

◮Калыптын жогорку ийкемдүүлүгү: Жогоркуны эффективдүү күчөтүү үчүн колдонсо болотGCбаалуулукжанаар кандай татаал ДНК шаблону.

◮Күчтүү берилгендик: берилгендик 6 эсеof кадимки Taq ферменти.

алдынкы күч


Продукт чоо-жайы

Продукт тегдери

Көп берилүүчү суроолор

Description

Foreasy HS Taq ДНК Полимераза ген рекомбинациялоо технологиясы менен Escherichia coli инженердик бактерияларында туюнтулган жаңы Taq ферменти.Фермент атайын процесс менен иштетилгенден кийин, ал'нын активдүүлүгү термикалык активдештирүү алдында бөгөттөлөт, ошону менен төмөнкү температуранын шарттарында праймерлердин же праймер димерлеринин спецификалык эмес күйгүзүлүшүнөн келип чыккан спецификалык эмес күчөтүүгө бөгөт коюлат.Бул продукт өтө спецификалык PCR React үчүн ылайыктууион, M ultiple x PCR , жогорку GC мазмуну (> 60%),мененэкинчи структураже башкакүчтүү геномicsкүчөтүү жана масштабдуу геномicsкүчөтүү аныктоо.Фермент 5' → 3' ДНК полимераза активдүүлүгүнө жана 5' → 3' экзонуклеаза активдүүлүгүнө ээ, бирок 3' → 5' экзонуклеаза активдүүлүгү жок.

Комплекттин компоненттери

Компонент IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq ДНК Полимераза (5 U/мкл)  5000 U (1 мл)  50 КУ (10 мл)  500 КУ (100 мл)
2× Taq Reaction Buffer  25 мл × 5  250 мл × 5  500 мл × 25

Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары

- Жогорку өзгөчөлүк: жогорку ысык баштоо активдүүлүгү менен фермент.

- Тез күчөтүү: 10 сек/кб.

- шаблондун жогорку ийкемдүүлүгү: Жогоркуны эффективдүү күчөтүү үчүн колдонсо болотGCбаалуулукжанаар кандай татаал ДНК шаблону.

- Күчтүү берилгендик: берилгендик 6 эсеof кадимки Taq ферменти.

Kit колдонмосу

- Ар кандай ПТР/qPCR системасы жана түз ПТР системасы

- ПТР күчөтүлгөн ДНК фрагменти

- ДНК белгиси

- ДНК секвенциясы

- ПЦР плюс А куйрук

Activity Definition

1U: 10 нмоль кошуу үчүн керектүү ферменттин көлөмүДНКшаблон/праймер катары активдештирилген лосось сперматозоидунун ДНКсын колдонуу менен кислотада эрибеген затка, 74 °C, 30 мүнөт.

Реакция шарты

Температура Реакция убактысы Цикл убактысы
37°C 5 мүнөт 1
94°C 5 мүнөт 1
94°C 10 Сек  40
60°C 10 Сек

Эскертүү:10 мкл жана 20 мкл системалар үчүн, термикалык циклде жылуулук капкагы жок болсо, бирдей көлөмдө минералдык май кошуңуз.

ПЦР реакциясынын шарттары калыптардын, праймерлердин жана ушул сыяктуулардын структуралык шарттарына жараша өзгөрөт.Конкреттүү операцияда калыптын түрү, максаттуу фрагменттин өлчөмү, күчөтүлгөн фрагменттин базалык ырааттуулугу жана ГК мазмуну жана праймердин узундугу сыяктуу спецификалык шарттарга ылайык оптималдуу реакция шарттарын, анын ичинде күйдүрүү температурасын, узартуу убактысын ж.б. долбоорлоо зарыл.

Сактагыч

-20 ± 5 °C 2 жыл же -80 °C узак мөөнөткө сактоо үчүн.

  • Мурунку:
  • Кийинки:

    • Күчөтүү сигналдары жок

    1.Комплекттеги Taq ДНК Полимераза туура эмес сакталгандыктан же комплекттин мөөнөтү аяктагандыктан активдүүлүгүн жоготот.
    Сунуш: комплекттин сактоо шарттарын ырастаңыз;Так ДНК Полимеразанын тиешелүү көлөмүн ПТР тутумуна кайра кошуңуз же тиешелүү эксперименттер үчүн жаңы Real Time ПТР комплектин сатып алыңыз.

    2.There ДНК шаблон Taq ДНК Полимераза ингибиторлору көп.
    Сунуш: Шаблонду кайра тазалаңыз же колдонулган шаблондун көлөмүн азайтыңыз.

    3.The Mg2+ концентрациясы ылайыктуу эмес.
    Сунуш: Биз берген 2× Реал ПТР Миксинин Mg2+ концентрациясы 3,5 мм.Бирок, кээ бир атайын праймерлер жана шаблондор үчүн Mg2+ концентрациясы жогору болушу мүмкүн.Ошондуктан, Mg2+ концентрациясын оптималдаштыруу үчүн MgCl2 түз кошсоңуз болот.Оптималдаштыруу үчүн ар бир жолу Mg2+ 0,5мМ көбөйтүү сунушталат.

    4.ПЦР күчөтүү шарттары ылайыктуу эмес жана праймердин ырааттуулугу же концентрациясы туура эмес.
    Сунуш: праймер ырааттуулугунун тууралыгын ырастаңыз жана праймер бузулган эмес;эгерде күчөтүү сигналы жакшы болбосо, күйгүзүү температурасын төмөндөтүп, праймердин концентрациясын тийиштүү түрдө тууралап көрүңүз.

    5.Шаблондун көлөмү өтө аз же өтө көп.
    Сунуш: Шаблонду линиаризациялоо градиенттин суюлтуусун аткарыңыз жана реалдуу убакыттагы ПТР эксперименти үчүн мыкты ПТР эффектиси менен калыптын концентрациясын тандаңыз.

    NTC өтө жогору флуоресценттик мааниге ээ

    1.Иш учурунда пайда болгон реагенттин булганышы.
    Сунуш: Real Time ПТР эксперименттери үчүн жаңы реагенттер менен алмаштырыңыз.

    2. Контаминация ПТР реакция системасын даярдоодо болгон.
    Сунуш: Иштөө учурунда зарыл болгон коргоочу чараларды көрүңүз, мисалы: латекс колкаптарды кийүү, чыпкасы бар пипетка үчүн ж.б.

    3.Праймерлер бузулуп, праймерлердин деградациясы спецификалык эмес күчөтүүнү пайда кылат.
    Сунуш: праймерлердин бузулгандыгын аныктоо үчүн SDS-PAGE электрофорезин колдонуңуз жана аны реалдуу убакыттагы ПТР эксперименттери үчүн жаңы праймерлер менен алмаштырыңыз.

    Primer dimer же спецификалык эмес күчөтүү

    1.The Mg2+ концентрациясы ылайыктуу эмес.
    Сунуш: Биз камсыз кылган 2× Real PCR EasyTM Mixтин Mg2+ концентрациясы 3,5 мм.Бирок, кээ бир атайын праймерлер жана шаблондор үчүн Mg2+ концентрациясы жогору болушу мүмкүн.Ошондуктан, Mg2+ концентрациясын оптималдаштыруу үчүн MgCl2 түз кошсоңуз болот.Оптималдаштыруу үчүн ар бир жолу Mg2+ 0,5мМ көбөйтүү сунушталат.

    2.The PCR annealing температурасы өтө төмөн.
    Сунуш: ПЦР күйгүзүү температурасын ар бир жолу 1℃ же 2℃ жогорулатыңыз.

    3.ПЦР продукт өтө узун.
    Сунуш: Реалдуу убакыттагы ПТР продуктунун узундугу 100-150 бит, 500 биттен ашпашы керек.

    4.Праймерлер бузулуп, праймерлердин бузулушу конкреттүү күчөтүүнүн пайда болушуна алып келет.
    Сунуш: праймерлердин бузулгандыгын аныктоо үчүн SDS-PAGE электрофорезин колдонуңуз жана аны реалдуу убакыттагы ПТР эксперименттери үчүн жаңы праймерлер менен алмаштырыңыз.

    5.ПЦР системасы туура эмес, же система өтө кичинекей.
    Сунуш: ПТР реакция системасы өтө кичинекей болсо, аныктоо тактыгынын төмөндөшүнө алып келет.Реалдуу убакыттагы ПТР экспериментин кайра иштетүү үчүн сандык ПТР аспабы сунуштаган реакция системасын колдонуу эң жакшы.

    Сандык маанилердин начар кайталанышы

    1. Аспап иштебей жатат.
    Сунуш: Аспаптын ар бир ПТР тешигинин ортосунда каталар болушу мүмкүн, натыйжада температураны башкаруу же аныктоодо начар кайталанууга алып келет.Тиешелүү аспаптын көрсөтмөлөрүнө ылайык текшериңиз.

    2.The үлгү тазалыгы жакшы эмес.
    Сунуш: Таза эмес үлгүлөр калыптын жана праймерлердин тазалыгын камтыган эксперименттин начар кайталанышына алып келет.Шаблонду кайра тазалоо эң жакшы, ал эми праймерлер SDS-PAGE аркылуу эң жакшы тазаланат.

    3.ПЦР системасын даярдоо жана сактоо убактысы өтө узун.
    Сунуш: Даярдоодон кийин дароо ПТР эксперименти үчүн Real Time ПТР системасын колдонуңуз жана аны көпкө калтырбаңыз.

    4.ПЦР күчөтүү шарттары ылайыктуу эмес жана праймердин ырааттуулугу же концентрациясы туура эмес.
    Сунуш: праймер ырааттуулугунун тууралыгын ырастаңыз жана праймер бузулган эмес;эгерде күчөтүү сигналы жакшы болбосо, күйгүзүү температурасын төмөндөтүп, праймердин концентрациясын тийиштүү түрдө тууралап көрүңүз.

    5.ПЦР системасы туура эмес, же система өтө кичинекей.
    Сунуш: ПТР реакция системасы өтө кичинекей болсо, аныктоо тактыгынын төмөндөшүнө алып келет.Реалдуу убакыттагы ПТР экспериментин кайра иштетүү үчүн сандык ПТР аспабы сунуштаган реакция системасын колдонуу эң жакшы.

    Бул жерге билдирүүңүздү жазып, бизге жөнөтүңүз

    байланыштууПродукциялар

    Издөө үчүн enter баскычын же жабуу үчүн ESC баскычын басыңыз