• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman

Комплекттин сүрөттөлүшү:

Жөнөкөй—эксперименттик катаны жана иштөө убактысын кыскартуу үчүн 2× ПТР аралашмасы

Спецификалык - оптималдаштырылган буфер жана ысык баштоо Taq ферменти спецификалык эмес күчөтүүнү жана праймер димеринин пайда болушун алдын алат

Жогорку сезгичтик — шаблондун аз көчүрмөлөрүн аныктай алат

Жакшы универсалдуу – көпчүлүк реалдуу убакыттагы сандык ПТР аспаптары менен шайкеш келет

алдынкы күч


Продукт чоо-жайы

Продукт тегдери

Көп берилүүчү суроолор

Комплекттин сүрөттөмөлөрү

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman Real Time PCR Easy тарабынан берилгенTM-Такман комплекти - бул продукттун өзгөчөлүгүн жана реакциянын сезгичтигин бир топ жакшырта турган реалдуу убакытта ПТР күчөтүү реакциялары үчүн атайын флуоресценттик зонддорду колдонгон жаңы премикс системасы.ROX ички башкаруу боёк катары берилет.

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman Foregene уникалдуу ысык баштоо Taq ДНК Полимераза камтыйт.Жөнөкөй Taq энзимдер менен салыштырганда, ал жогорку күчөтүү натыйжалуулугун, күчтүү өзгөчө күчөтүү жөндөмдүүлүгүн жана төмөн дал келбөө ылдамдыгы артыкчылыктарга ээ.Ал спецификалык эмес күчөтүүнү азайтып, ПЦР тактыгын жогорулата алат.

Техникалык шарттар

Real Time PCR EasyTM-Такман

Комплекттин курамы (20мкл системасы)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Чыныгы ПТРОңойTMMix-Такман

1 мл ×2

1.7 мл ×3

1.7 мл ×6

1.7 мл ×12

20×ROX Reference Dye

200 мкл

0.5ml

1 мл

1 мл × 2

DNase-Free ddH2O

1,7 мл

1.7 мл ×2

10 мл

20 мл

Iнструкция

1

1

1

1

Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары

■ Жөнөкөй—эксперименттик катаны жана иштөө убактысын кыскартуу үчүн 2X PCR Mix

■ Спецификалык - оптималдаштырылган буфер жана ысык баштоо Taq ферменти спецификалык эмес күчөтүүнү жана праймер димеринин пайда болушун алдын алат

■ Жогорку сезгичтик — шаблондун аз көчүрмөлөрүн аныктай алат

■ Жакшы ар тараптуулугу — реалдуу убакыттагы сандык ПТР аспаптарынын көбү менен шайкеш келет

Kit колдонмосу

qPCR анализи

Иш агымы

RT PCR-Takman
RT PCR-Taqman графикасы

Графика

Сактоо жана сактоо мөөнөтү

Бул комплект жарыктан алыс сакталышы керек жана -20 ℃ сакталышы керек.Эгерде тез-тез колдонулса, аны 4℃ температурада да кыска мөөнөткө (10 күн) сактоого болот.


  • Мурунку:
  • Кийинки:

  • Күчөтүү сигналдары жок

    1.Комплекттеги Taq ДНК Полимераза туура эмес сакталгандыктан же комплекттин мөөнөтү аяктагандыктан активдүүлүгүн жоготот.
    Сунуш: комплекттин сактоо шарттарын ырастаңыз;Так ДНК Полимеразанын тиешелүү көлөмүн ПТР тутумуна кайра кошуңуз же тиешелүү эксперименттер үчүн жаңы Real Time ПТР комплектин сатып алыңыз.

    2.There ДНК шаблон Taq ДНК Полимераза ингибиторлору көп.
    Сунуш: Шаблонду кайра тазалаңыз же колдонулган шаблондун көлөмүн азайтыңыз.

    3.The Mg2+ концентрациясы ылайыктуу эмес.
    Сунуш: Биз берген 2× Реал ПТР Миксинин Mg2+ концентрациясы 3,5 мм.Бирок, кээ бир атайын праймерлер жана шаблондор үчүн Mg2+ концентрациясы жогору болушу мүмкүн.Ошондуктан, Mg2+ концентрациясын оптималдаштыруу үчүн MgCl2 түз кошсоңуз болот.Оптималдаштыруу үчүн ар бир жолу Mg2+ 0,5мМ көбөйтүү сунушталат.

    4.ПЦР күчөтүү шарттары ылайыктуу эмес жана праймердин ырааттуулугу же концентрациясы туура эмес.
    Сунуш: праймер ырааттуулугунун тууралыгын ырастаңыз жана праймер бузулган эмес;эгерде күчөтүү сигналы жакшы болбосо, күйгүзүү температурасын төмөндөтүп, праймердин концентрациясын тийиштүү түрдө тууралап көрүңүз.

    5.Шаблондун көлөмү өтө аз же өтө көп.
    Сунуш: Шаблонду линиаризациялоо градиенттин суюлтуусун аткарыңыз жана реалдуу убакыттагы ПТР эксперименти үчүн мыкты ПТР эффектиси менен калыптын концентрациясын тандаңыз.

    NTC өтө жогору флуоресценттик мааниге ээ

    1.Иш учурунда пайда болгон реагенттин булганышы.
    Сунуш: Real Time ПТР эксперименттери үчүн жаңы реагенттер менен алмаштырыңыз.

    2. Контаминация ПТР реакция системасын даярдоодо болгон.
    Сунуш: Иштөө учурунда зарыл болгон коргоочу чараларды көрүңүз, мисалы: латекс колкаптарды кийүү, чыпкасы бар пипетка үчүн ж.б.

    3.Праймерлер бузулуп, праймерлердин деградациясы спецификалык эмес күчөтүүнү пайда кылат.
    Сунуш: праймерлердин бузулгандыгын аныктоо үчүн SDS-PAGE электрофорезин колдонуңуз жана аны реалдуу убакыттагы ПТР эксперименттери үчүн жаңы праймерлер менен алмаштырыңыз.

    Primer dimer же спецификалык эмес күчөтүү

    1.The Mg2+ концентрациясы ылайыктуу эмес.
    Сунуш: Биз камсыз кылган 2× Real PCR EasyTM Mixтин Mg2+ концентрациясы 3,5 мм.Бирок, кээ бир атайын праймерлер жана шаблондор үчүн Mg2+ концентрациясы жогору болушу мүмкүн.Ошондуктан, Mg2+ концентрациясын оптималдаштыруу үчүн MgCl2 түз кошсоңуз болот.Оптималдаштыруу үчүн ар бир жолу Mg2+ 0,5мМ көбөйтүү сунушталат.

    2.The PCR annealing температурасы өтө төмөн.
    Сунуш: ПЦР күйгүзүү температурасын ар бир жолу 1℃ же 2℃ жогорулатыңыз.

    3.ПЦР продукт өтө узун.
    Сунуш: Реалдуу убакыттагы ПТР продуктунун узундугу 100-150 бит, 500 биттен ашпашы керек.

    4.Праймерлер бузулуп, праймерлердин бузулушу конкреттүү күчөтүүнүн пайда болушуна алып келет.
    Сунуш: праймерлердин бузулгандыгын аныктоо үчүн SDS-PAGE электрофорезин колдонуңуз жана аны реалдуу убакыттагы ПТР эксперименттери үчүн жаңы праймерлер менен алмаштырыңыз.

    5.ПЦР системасы туура эмес, же система өтө кичинекей.
    Сунуш: ПТР реакция системасы өтө кичинекей болсо, аныктоо тактыгынын төмөндөшүнө алып келет.Реалдуу убакыттагы ПТР экспериментин кайра иштетүү үчүн сандык ПТР аспабы сунуштаган реакция системасын колдонуу эң жакшы.

    Сандык маанилердин начар кайталанышы

    1. Аспап иштебей жатат.
    Сунуш: Аспаптын ар бир ПТР тешигинин ортосунда каталар болушу мүмкүн, натыйжада температураны башкаруу же аныктоодо начар кайталанууга алып келет.Тиешелүү аспаптын көрсөтмөлөрүнө ылайык текшериңиз.

    2.The үлгү тазалыгы жакшы эмес.
    Сунуш: Таза эмес үлгүлөр калыптын жана праймерлердин тазалыгын камтыган эксперименттин начар кайталанышына алып келет.Шаблонду кайра тазалоо эң жакшы, ал эми праймерлер SDS-PAGE аркылуу эң жакшы тазаланат.

    3.ПЦР системасын даярдоо жана сактоо убактысы өтө узун.
    Сунуш: Даярдоодон кийин дароо ПТР эксперименти үчүн Real Time ПТР системасын колдонуңуз жана аны көпкө калтырбаңыз.

    4.ПЦР күчөтүү шарттары ылайыктуу эмес жана праймердин ырааттуулугу же концентрациясы туура эмес.
    Сунуш: праймер ырааттуулугунун тууралыгын ырастаңыз жана праймер бузулган эмес;эгерде күчөтүү сигналы жакшы болбосо, күйгүзүү температурасын төмөндөтүп, праймердин концентрациясын тийиштүү түрдө тууралап көрүңүз.

    5.ПЦР системасы туура эмес, же система өтө кичинекей.
    Сунуш: ПТР реакция системасы өтө кичинекей болсо, аныктоо тактыгынын төмөндөшүнө алып келет.Реалдуу убакыттагы ПТР экспериментин кайра иштетүү үчүн сандык ПТР аспабы сунуштаган реакция системасын колдонуу эң жакшы.

    Бул жерге билдирүүңүздү жазып, бизге жөнөтүңүз