Вирустук ДНКны жана РНКны изоляциялоо комплекти Вирустук ДНКны жана РНКны экстракциялоону тазалоону даярдоочу топтомдорду
Техникалык шарттар
50 даярдык, 200 даярдык
Вирустук РНК нуклеиндик кислотаны тазалоочу изоляциялык комплект Foregene тарабынан иштелип чыккан спиндик мамычаны жана формуланы колдонот, ал плазма, сары суу, клеткасыз дене суюктугу жана клетка культурасынын супернатанты сыяктуу үлгүлөрдөн жогорку тазалыктагы жана сапаттуу вирустук РНКны эффективдүү бөлүп ала алат.Комплект үлгүлөрдөн аз өлчөмдөгү РНКны оңой кармай алган сызыктуу акриламидди кошот.РНК гана мамычасы РНКны эффективдүү байланыштыра алат.Комплект бир эле учурда көп сандагы үлгүлөрдү иштете алат.
Бүт комплект RNase камтыбайт, ошондуктан тазаланган РНК бузулбайт.ViRW1 буфери жана viRW2 буфери алынган вирустук нуклеин кислотасынын белоктун, нуклеазанын же башка аралашмалардын жок болушун камсыздай алат, алар түздөн-түз төмөнкү агымдагы молекулярдык биология эксперименттери үчүн колдонулушу мүмкүн.
Комплекттин компоненттери
| Сызыктуу акриламид |
| буфер DRL |
| RW1 буфери, RW2 буфери |
| RNase-Free ddH2O |
| ДНК/РНК тилкеси |
| Instructions |
Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары
■ Бүт процесс бою бөлмө температурасында (15-25℃) иштөө, муз ваннасы жана төмөнкү температурадагы центрифугасыз.
■ RNase-Free толук комплект, РНКнын бузулушу жөнүндө тынчсыздануунун кереги жок.
■ Нуклеин кислотасынын жогорку түшүмдүүлүгү: ДНК/РНК гана мамыча жана уникалдуу формула ДНК менен РНКны эффективдүү тазалай алат.
■ Чоң үлгүлөрдү иштетүү кубаттуулугу: 200μl үлгүлөрдү ар бир жолу иштетсе болот.
■ Тез ылдамдык: иштетүү оңой жана 20 мүнөттүн ичинде бүтүрүүгө болот.
■ Коопсуздук: эч кандай органикалык реагент талап кылынбайт.
■ Жогорку сапат: Тазаланган РНК фрагменттери жогорку тазалыкка ээ, белок жана башка аралашмалар жок жана ар кандай ылдыйкы эксперименттик колдонмолорго жооп бере алат.
Kit колдонмосу
Ал плазма, сарысу, клеткасыз дене суюктугу жана клетка культурасынын супернатанты сыяктуу үлгүлөрдөгү вирустук нуклеин кислотасын алуу жана тазалоо үчүн ылайыктуу.
Иш агымы
Диаграмма
Сактоо жана сактоо мөөнөтү
■ Бул комплект бөлмө температурасында (15-25℃) кургак шарттарда 24 ай сакталат;узак убакытка сактоо керек болсо, 2–8℃ температурада сактаса болот.
■ Сызыктуу акриламид эритмесин бөлмө температурасында 7 күн сактоого болот;комплектти алгандан кийин, аны алып чыгып, -20°C температурада сактаңыз.
■ Буфердик DRLге сызыктуу акриламидди кошкондон кийин, аны 2-8°C температурада 48 саатка чейин сактоого болот.Даяр чечимди колдонуңуз.
Проблемаларды талдоо боюнча колдонмо
Төмөндө вирустук ДНК/РНКны экстракциялоодо пайда болушу мүмкүн болгон көйгөйлөрдүн анализи келтирилген, бул сиздин эксперименттериңизге жардам берет.Мындан тышкары, операциялык нускамалардан жана көйгөйлөрдү талдоодон башка эксперименттик же техникалык көйгөйлөр үчүн биз сизге жардам берүү үчүн техникалык колдоону арнадык.Эгер кандайдыр бир муктаждыктарыңыз болсо, биз менен байланышыңыз: 028-83360257 же E-mail:
Tech@foregene.com.
Нуклеин кислотасын экстракциялоо жок же нуклеин кислотасынын төмөн түшүмү
Көбүнчө калыбына келтирүүнүн натыйжалуулугуна таасир этүүчү көптөгөн факторлор бар, мисалы: үлгүдөгү нуклеин кислотасынын курамы, иштөө ыкмасы, элюция көлөмү ж.б.
Жалпы себептерди талдоо:
1. Процедуранын жүрүшүндө муз ваннасы же төмөнкү температурада (4°C) центрифугалоо жүргүзүлдү.
Сунуш: Бүт процессти бөлмө температурасында (15-25°C) иштетиңиз, муз ваннасын жана төмөнкү температурада центрифугалоону жасабаңыз.
2. Үлгү туура эмес сакталган же үлгү өтө көпкө сакталган.
Сунуш: Үлгүлөрдү -80°C температурада сактаңыз жана кайталап тоңдуруудан жана эрүүдөн сактаңыз;нуклеин кислотасын алуу үчүн жаңы чогултулган үлгүлөрдү колдонууга аракет кыл.
3. Үлгү лизисинин жетишсиздиги.
Сунуш: Үлгү жана лизис жумушчу эритмени кылдат аралаштырып, бөлмө температурасында (15-25°C) 10 мүнөт инкубациялоону текшериңиз.
4. Элюенттин туура эмес кошулушу.
Сунуш: RNase-Free ddH2O тазалоо тилкесинин мембранасынын ортосуна тамчылатып кошулганын текшериңиз жана аны тазалоо тилкесинин шакекчесине түшүрбөңүз.
5. RW2 буферине абсолюттук этанолдун туура көлөмү кошулган эмес.
Сунуш: Көрсөтмөлөрдү аткарып, RW2 буферине абсолюттук этанолдун туура көлөмүн кошуп, комплектти колдонуудан мурун жакшылап аралаштырыңыз.
6. Туура эмес үлгү көлөмү.
Сунуш: Ар бир 500μl Buffer DRL үчүн 200μл үлгү иштетилет.Үлгүлөрдү ашыкча иштетүү нуклеин кислотасынын экстракциясынын түшүмдүүлүгүн төмөндөтөт.
7. Элюциянын туура эмес көлөмү же толук эмес элюция.
Сунуш: тазалоо колоннасынын элюент көлөмү 30-50μl болуп саналат;эгерде элюция эффектиси канааттандырарлык болбосо, алдын ала ысытылган RNase-Free ddH2O кошкондон кийин бөлмө температурасында убакытты узартуу сунушталат, мисалы 5-10мин.
8. Buffer RW2 менен жуугандан кийин этанол колонкада калат.
Сунуш: Буфер RW2 менен центрифугалоодон кийин этанол 2 мүнөт калса, этанолдун калдыктарын толугу менен алып салуу үчүн центрифугалоодон кийин колонканы бөлмө температурасында 5 мүнөткө коюуга болот.
Тазаланган нуклеин кислотасы бузулат
Тазаланган нуклеин кислотасынын сапаты үлгүнүн сакталышы, RNase булганышы, иштеши жана башка факторлор менен байланыштуу.Жалпы себептерди талдоо:
1. Алынган үлгүлөр өз убагында сакталган эмес.
Сунуш: Эгерде үлгү чогултулгандан кийин өз убагында колдонулбаса, аны дароо -80°C төмөн температурада сактаңыз.РНКны алуу үчүн жаңы чогултулган үлгүлөрдү колдонууга аракет кылыңыз.
2. Үлгүлөрдү чогултуу жана кайра-кайра тоңдуруу жана эрүү.
Сунуш: Үлгүлөрдү чогултуу жана сактоо учурунда тоңдуруудан жана эритүүдөн (бир жолудан көп эмес) качыңыз, антпесе нуклеин кислотасынын түшүмдүүлүгү төмөндөйт.
3. Операция бөлмөсүнө RNase киргизилет же бир жолу колдонулуучу кол каптар, маскалар ж.б. кийилбейт.
Сунуш: РНКны экстракциялоо эксперименттери өзүнчө РНК операциялык бөлмөсүндө эң жакшы аткарылат жана лабораториялык үстөл эксперимент алдында тазаланышы керек.
Эксперимент учурунда РНКнын деградациясын болтурбоо үчүн бир жолу колдонулуучу кол каптарды жана маскаларды кийиңиз.
4. Реагент колдонуу учурунда RNase менен булганган.
Сунуш: Тиешелүү эксперименттер үчүн жаңы вирустук ДНК/РНК изоляция комплекти менен алмаштырыңыз.
5. РНК менен манипуляциялоо үчүн колдонулган центрифуга түтүктөрү жана пипеткалардын учтары RNase менен булганган.
Сунуш: РНКны экстракциялоо үчүн колдонулган центрифуга түтүктөрүнүн, пипеткалардын учтары, пипеткалар ж.б. баары RNase-эркин экендигин текшериңиз.
Тазаланган нуклеин кислотасы төмөнкү агымдагы эксперименттерге таасир этет
Тазалоо тилкесинде тазаланган ДНК жана РНК, эгерде туздун ионунун жана белоктун мазмуну өтө жогору болсо, ал төмөнкү агымдагы эксперименттерге таасирин тийгизет, мисалы: ПТР күчөтүү, тескери транскрипция ж.б.
1. Элюцияланган ДНК менен РНКда туздун калдык иондору бар.
Сунуш: RW2 буферине абсолюттук этанолдун туура көлөмү кошулганын текшериңиз жана тазалоо тилкесин иштетүү нускамаларында көрсөтүлгөн центрифугалоо ылдамдыгы менен эки жолу жууңуз;Туз ионунун булганышын азайтуу үчүн центрифугалоо жүргүзүңүз.
2. Эллюцияланган ДНК менен РНКда этанолдун калдыктары бар.
Сунуш: RW2 буфери менен жууганды ырастагандан кийин, колдонуу нускамасындагы центрифугалоо ылдамдыгы боюнча бош түтүктү центрифугалоону жүргүзүңүз;эгерде дагы эле этанолдун калдыктары бар болсо, сиз бош түтүктү центрифугалап, андан соң этанолдун калдыктарын эң чоң өлчөмдө алып салуу үчүн аны бөлмө температурасында 5 мүнөткө койсоңуз болот.
Instruction Manuals:
Вирустук ДНК жана РНК изоляциясынын комплекти нускамалары
