Вирустук РНКны плазмадан, сывороткадан жана башка үлгүлөрдөн тазалоо үчүн вирустук РНКны изоляциялоо комплекти
Комплекттин сүрөттөлүшү:
Cat.No.RE-02011/02014
Вирустук РНКны плазмадан, сывороткадан, клеткасыз дене суюктуктарынан, клетка маданиятынын супернатанттарынан тазалоо үчүн.
Вирустук РНКны плазма, сарысу, клеткасыз дене суюктуктары жана клетка маданиятынын супернатанттары сыяктуу үлгүлөрдөн тез бөлүп алыңыз жана тазалаңыз.
-РНКнын бузулушу жөнүндө тынчсыздануунун кереги жок.Бүт комплект RNase-Free болуп саналат
-Жөнөкөй—бардык операциялар бөлмө температурасында аткарылат
-Тез—операцияны 20 мүнөттө бүтүрүүгө болот
-Жогорку РНК кирешеси: РНК гана мамычасы жана уникалдуу формула РНКны эффективдүү тазалай алат
-Коопсуз-органикалык реагент колдонулбайт
- Large үлгү иштетүү кубаттуулугу - 200μl үлгүлөрдү ар бир жолу иштетүүгө болот.
-Жогорку сапат-тазаланган РНК абдан таза, белок жана башка аралашмалар жок жана ар кандай ылдыйкы эксперименттик колдонмолорго жооп бере алат.
Сүрөттөмөлөр
Комплект Foregene тарабынан иштелип чыккан спиндик мамычаны жана формуланы колдонот, ал плазма, сыворотка, клеткасыз дене суюктугу жана клетка маданиятынын супернатанты сыяктуу үлгүлөрдөн жогорку тазалыктагы жана сапаттуу вирустук РНКны эффективдүү бөлүп алат.Комплект үлгүлөрдөн аз өлчөмдөгү РНКны оңой кармай алган сызыктуу акриламидди кошот.РНК гана мамычасы РНКны эффективдүү байланыштыра алат.Комплект бир эле учурда көп сандагы үлгүлөрдү иштете алат.
Бүт комплект RNase камтыбайт, ошондуктан тазаланган РНК бузулбайт.ViRW1 буфери жана viRW2 буфери алынган вирустук нуклеин кислотасынын белоктун, нуклеазанын же башка аралашмалардын жок болушун камсыздай алат, алар түздөн-түз төмөнкү агымдагы молекулярдык биология эксперименттери үчүн колдонулушу мүмкүн.
Техникалык шарттар
50 даярдык, 200 даярдык
Комплекттин компоненттери
| Сызыктуу акриламид |
| Буфер viRL |
| Буфер viRW1, буфер viRW2 |
| RNase-Free ddH2O |
| РНК гана тилкеси |
| Instructions |
Өзгөчөлүктөрү жана артыкчылыктары
-РНКнын бузулушу жөнүндө тынчсыздануунун кереги жок.Бүт комплект RNase-Free болуп саналат
-Жөнөкөй—бардык операциялар бөлмө температурасында аткарылат
-Тез—операцияны 20 мүнөттө бүтүрүүгө болот
-Жогорку РНК кирешеси: РНК гана мамычасы жана уникалдуу формула РНКны эффективдүү тазалай алат
-Коопсуз-органикалык реагент колдонулбайт
- Large үлгү иштетүү кубаттуулугу - 200μl үлгүлөрдү ар бир жолу иштетүүгө болот.
-Жогорку сапат-тазаланган РНК абдан таза, белок жана башка аралашмалар жок жана ар кандай ылдыйкы эксперименттик колдонмолорго жооп бере алат.
Комплекттин параметрлери
Комплекттин колдонмосу:
Ал плазма, сарысу, клеткасыз дене суюктугу жана клетка маданиятынын супернатант сыяктуу үлгүлөрдөгү вирустук РНКны экстракциялоо жана тазалоо үчүн ылайыктуу.
Иш агымы
Сактоо шарттары
- Комплект бөлмө температурасында (15-25 ℃) 24 айга же 2-8 ℃ узак убакытка сакталат.
-Сызыктуу акриламид эритмесин бөлмө температурасында 7 күн сактоого болот.Комплектти алгандан кийин, сызыктуу акриламид эритмесин алып чыгып, -20℃ температурада сактаңыз.
- Буфер viRLге сызыктуу акриламидди кошкондон кийин, аны 2-8℃ температурада 48 саатка чейин сактоого болот.Сураныч, жаңы даярдалган эритмени колдонуңуз.
Проблемаларды талдоо үчүн колдонмолор
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Эч бир РНК алынбайт же нуклеин кислотасынын түшүмү төмөн
Калыбына келтирүү эффективдүүлүгүнө таасир этүүчү көптөгөн факторлор бар, мисалы: үлгү РНКсынын мазмуну, иштөө ыкмасы, элюция көлөмү ж.б..
Жалпы себептерди талдоо:
1.Ice ваннасы же төмөнкү температурадагы (4°C) операция учурунда центрифугалоо.
Сунуш: бөлмө температурасында (15-25 ° C) иштөө, эч качан муз ваннасы жана төмөнкү температурадагы центрифуга.
2. Туура эмес үлгү сактоо же өтө көпкө үлгү сактоо.
Сунуш: Үлгүлөрдү -80 ° C температурада сактаңыз же суюк азотто тоңдуруңуз жана тоңдуруу-эритүү процессин кайталап колдонуудан качыңыз;РНК алуу үчүн жаңы чогултулган үлгүлөрдү колдонууга аракет кыл.
3. Үлгү лизиси жетишсиз
Сунуш: Үлгү жана жумушчу эритме (сызыктуу акриламид) кылдат аралаштырылып, бөлмө температурасында (15-25 ° C) 10 мүнөт инкубацияланганын текшериңиз.
4.Элюент туура эмес кошулган
Сунуш: RNase-Free ddH2O тазалоо тилкесинин мембранасынын ортосуна кошулганын текшериңиз
5.ViRW2 буфериндеги суусуз этанолдун туура эмес көлөмү
Сунуш: Инструкцияларды аткарыңыз, viRW2 буферине суусуз этанолдун туура көлөмүн кошуп, комплектти колдонуудан мурун аларды жакшылап аралаштырыңыз.
6.Improper үлгү колдонуу.
Сунуш: Bufer viRL 500μl үчүн 200μл үлгү.Ашыкча үлгү көлөмү кыскарган РНК казып алуу ылдамдыгын алып келет.
7.Туура эмес элюция көлөмү же толук эмес элюция.
Сунуш: тазалоо колоннасынын элюент көлөмү 30-50μl болуп саналат;эгерде элюция эффектиси канааттандырарлык болбосо, алдын ала ысытылган RNase-Free ddH кошуу сунушталат.2О жана бөлмө температурасында жайгаштыруу убактысын узартуу, мисалы, 5-10мин
8.Тазалоо тилкесинде Buffer viRW2 менен жуугандан кийин этанолдун калдыктары бар.
Сунуш: Эгерде viRW2 буферинде чайкоодон кийин этанол дагы эле кала берсе жана бош түтүктү 2 мүнөткө центрифугалагандан кийин, калган этанолду толук алып салуу үчүн тазалоо колонкасын бош түтүк центрифугалоодон кийин бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырса болот.
Тазаланган РНК молекулаларынын бузулушу
Тазаланган РНКнын сапаты үлгү сактоо, RNase булганышы жана иштөө сыяктуу факторлорго байланыштуу.
Жалпы себептерди талдоо:
1.Жыйналган үлгүлөр убагында сакталган эмес.
Сунуш: Эгерде үлгү чогултулгандан кийин өз убагында колдонулбаса, аны дароо -80 ℃ же суюк азотто сактаңыз.РНК молекулаларын алуу үчүн, мүмкүн болушунча жаңы чогултулган үлгүлөрдү колдонууга аракет кылыңыз.
2.Collected үлгүлөр кайра-кайра тоңдуруу жана эрүү болгон.
Сунуш: Үлгүлөрдү чогултуу жана сактоо учурунда кайра-кайра тоңдуруудан жана эритүүдөн (бир жолудан ашык эмес) качыңыз, антпесе нуклеин кислотасынын түшүмдүүлүгү төмөндөйт.
3.RNase операциялык бөлмөдө киргизилген же бир жолу колдонулуучу кол каптар, маскалар ж.б. кийилген эмес.
Сунуш: РНК молекулаларын экстракциялоо эксперименти өзүнчө РНК операциялык бөлмөсүндө эң жакшы аткарылат жана эксперименталдык стол эксперимент алдында тазаланат.Эксперимент учурунда RNase киргизүү менен шартталган РНК деградациясын болтурбоо үчүн бир жолу колдонулуучу кол каптарды жана маскаларды кийиңиз.
4.Колдонуу учурунда реагент RNase менен булганган.
Сунуш: Тиешелүү эксперименттер үчүн жаңы вирустук РНК изоляция комплектине алмаштырыңыз.
5. Центрифуга түтүкчөлөрүнүн, пипеткалардын учтарынын, ж.б. RNase менен булганышы. Сунуш: Центрифуга түтүктөрүнүн, пипеткалардын учтары жана пипеткалардын бардыгы RNase-эркин экендигин текшериңиз.
Тазаланган РНК молекулалары төмөнкү агымдагы эксперименттерге таасирин тийгизди
Тазалоо тилкесинде тазаланган РНК молекулалары туз иондору же белоктор өтө көп болсо, төмөнкү агымдагы эксперименттерге таасир этет, мисалы: тескери транскрипция, Түндүк Блот ж.б.
1.Элюцияланган РНК молекулаларында калган туз иондору бар.
Сунуш: viRW2 буферине суусуз этанолдун туура көлөмү кошулганын текшериңиз жана тазалоо тилкесин иштетүү нускамасындагы туура центрифугалоо ылдамдыгына ылайык эки жолу жууп алыңыз; Эгерде дагы эле туз иондору калган болсо, сиз viRW2 буферин тазалоо колонкасына кошуп, бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырсаңыз болот.Андан кийин туз иондорунун булганышын эң чоң деңгээлде жок кылуу үчүн центрифугалоо жүргүзүңүз
2.Элюцияланган РНК молекулаларында этанол калган
Сунуш: тазалоо тилкелери viRW2 буфери менен чайкалганын ырастагандан кийин, колдонуу нускамасындагы центрифугалык ылдамдыкка ылайык бош түтүктү центрифугалоону жүргүзүңүз.Эгерде этанол дагы эле калган болсо, анда калган этанолду эң чоң өлчөмдө алып салуу үчүн бош түтүк центрифугалоодон кийин бөлмө температурасында 5 мүнөткө калтырууга болот.
Instruction Manuals:
Вирустук РНК изоляциясынын комплектинин нускамалары
