Түз RT-qPCR комплекти
Комплекттин сүрөттөлүшү:
◮ Түз RT-qPCR комплекти Foregene тарабынан иштелип чыккан Foreasy Reverse Transscriptase жана Foreasy HS Taq ДНК Полимеразасын колдонуп, уникалдуу реакция буфери менен бул комплектти күчтүү каршылык жана шайкештик менен түзөт жана ал Foregene Lysis системасын калып катары түздөн-түз сынай алат.Бул комплект COVID-19 нуклеин кислотасын аныктоочу комплект жана башка патогендик бактериялардын нуклеин кислотасын аныктоочу комплектти иштеп чыгуу үчүн колдонулушу мүмкүн.
Description
Түз RT-qPCR Kit өзүнчө пакеттелген RT-qPCR буферин жана жогорку эффективдүү ферментти камсыз кылатаралашма (Taq、M-MLV、RI), аны арткы комплекттерди жана системаны түзүү үчүн ыңгайлуу кылуужөндөө, жөнөкөй текшерүүнүн ичинде.
Техникалык шарттар
500T, 50,000T
Комплекттин компоненттери
| Комплекттин мазмуну (20 мкл реакция системасы) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 Т | 50 000 Т | |
| Түз фермент аралашмасы | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2× Түз RT-qPCR буфери | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Instruction | 1 | 1 |
Иштөө кадамдары
Реагенттерди даярдоонун алдында комплекттеги бардык реагенттерди бөлмө температурасында эритип, акырын аралаштыруу керек.
A: Даярда of шаблон жана реагент
1. Даярдалган РНК шаблонун (РНК үлгүсүн бөлүп алуу жана тазалоо үчүн Foregene Total RNA Isolation Kit сериясынын комплектин колдонуу сунушталат) же үлгүдөгү крекинг продуктусун (Foregene Lysis системасын колдонуу сунушталат), спецификалык праймерлерди (10 мкм) жана башка тиешелүү чыгымдалуучу материалдарды, аспапты даярдаңыз.
2. 2× Түз RT-qPCR буферин, RNase-Free ddH2O жана 20× ROX маалымдама боёгун (эгерде ал болсо) коюңуз'керек) муз менен кутуга салып, аларды табигый түрдө эритип, акырын аралаштырыңыз.
B: Даярда of RT-qPCR системасы
Таблица 1 : Даярда of RT-qPCR sсистемасы
| Компонент | Көлөм | Акыркы концентрация |
| 2× Түз RT-qPCR буфери | 10 мкл | 1× |
| Түз фермент аралашмасы | 1мкл | |
| Алдыга праймер (10 мкм) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Тескери праймер (10 мкм) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Зонд (4 мкм) | 1мкл | 200нМ |
| Үлгү (РНК же Лизат) | X мкл | |
| 20×ROX шилтеме боёгу | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) мкл | |
| Жалпы көлөмү | 20мкл |
C: коюу the RT-qPCR реакция программасы
Таблица 2 : RT-qPCR реакцияon программасы орнотуу (үчүн мисал: эки-кадам ыкмасы)
| Кадам | Температура | Убакыт | Циклдер | Мазмун | |
| 1 | 50℃ | 15 мин | 1* | 1 | Тескери транскрипция |
| 2 | 95℃ | 1 мүнөт | 1 | Алдын ала денатурация | |
| 3 | 95℃ | 10 сек | 40-45 | Денатурация | |
| 60℃ | 30 сек 2* | Anneal/Extension | |||
Сактоо жана сактоо мөөнөтү
-Комплект -20да сакталышы керек± 5℃.Жарактуулук мөөнөтү 12 ай.
-Кайталануучу тоңдуруу-эрүү циклдарынан качыңыз (<5 цикл).
