ForeDirect RT-qPCR комплекти
Комплекттин сүрөттөлүшү:
◮РНКны тазалоо процесстери жок тампон коллекцияларынан РНКны түз реалдуу убакыт режиминде күчөтүү үчүн.Бул комплект qRT-PCR циклдерин бир сааттын ичинде бүтүрөт.Фермент аралашмасы - бул Reverse Transscriptase, Hot-Start Taq ДНК полимераза, RNase ингибиторунун оптималдаштырылган аралашмасы.Reaction Buffer бардык керектүү компоненттерди камтыйт, анын ичинде оптималдаштырылган буфер компоненттери, Mg2+, dUTP жана dNTPs.
Description
ForeDirect RT-qPCR комплекти РНКны тазалоо процесстерисиз тампон коллекцияларынан РНКны түз реалдуу убакыт режиминде күчөтүү үчүн иштелип чыккан.Бул комплект qRT-PCR циклдерин бир сааттын ичинде бүтүрөт.Фермент аралашмасы - бул Reverse Transscriptase, Hot-Start Taq ДНК полимераза, RNase ингибиторунун оптималдаштырылган аралашмасы.Reaction Buffer бардык керектүү компоненттерди камтыйт, анын ичинде оптималдаштырылган буфер компоненттери, Mg2+, dUTP жана dNTPs.
Техникалык шарттар
100T
Комплекттин компоненттери
| Нуклеин кислотасын чыгаруучу агент |
| РНК коргоочу |
| 2× RT-qPCR буфери |
| Фермент аралашмасы (Taq&M-MLV) |
| Instructions |
ПЦР колдонмосу
1. ПЦР реакциясынын түтүктөрүн кыска убакытка центрифугалагандан кийин, аларды күчөтүү приборунун үлгү багына салыңыз.
2. Жылуулук протоколу
| Кадам | Температура | Убакыт | Циклдер | |
| 1 | Тескери транскрипция | 50℃ | 15 мүн | 1 |
| 2 | Алдын ала денатурация | 95℃ | 1 мүнөт | 1 |
| 3 | Денатурация | 95℃ | 10 секунд | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60℃ | 30 секунд | |
Эскертүү:Флуоресценттик сигнал ар бир циклдин узартуу кадамынан кийин дароо аныкталган.
3. Орнотуудан кийин файлды сактап, реакция программасын иштетиңиз.
Иштөө кадамдары
Реагенттерди даярдоонун алдында комплекттеги бардык реагенттерди бөлмө температурасында эритип, акырын аралаштыруу керек.
Реагент даярдоо
1. Нуклеин кислотасын чыгаруучу аралашманы даярдаңыз
| Компонент | Үлгүгө же контролго карата көлөм |
| Нуклеин кислотасын чыгаруучу агент | 5μL |
| РНК коргоочу | 0,5 мкл |
2. Реакция аралашмасын даярдаңыз
| Компонент | Үлгүгө же контролго карата көлөм |
| 2× RT-qPCR буфери | 15 мкл |
| Фермент аралашмасы (Taq&M-MLV) | 1,5 мкл |
| Праймерлер жана зонддор | 1μL |
Сактоо жана сактоо мөөнөтү
-Комплект -20да сакталышы керек± 5℃.Жарактуулук мөөнөтү 12 ай.
-Кайталануучу тоңдуруу-эрүү циклдарынан качыңыз (<5 цикл).
